فهرست مطالب
نشریه تحقیقات دامپزشکی و فرآورده های بیولوژیک
سال سیام شماره 3 (پیاپی 116، پاییز 1396)
- تاریخ انتشار: 1396/06/28
- تعداد عناوین: 30
-
- مقاله مروری
-
صفحات 2-15آناپلاسموزیس بیماری است که از طریق کنه منتقل می شود و عامل مسبب آن گونه های مختلف آناپلاسما می باشند. آناپلاسما مارجیناله با اهمیت ترین گونه از نظر دامپزشکی در خانواده آناپلاسماتاسه آمی باشد. بیماری از شایع ترین انگل های خونی گاو است و در مناطق گرمسیری، نیمه گرمسیری و اغلب مناطق معتدل جهان همه گیر می باشد. تهاجم و تکثیر آناپلاسما مارجیناله در گلبول های قرمز گاو باعث کم خونی، از دست دادن وزن و سقط و در فرم حاد در برخی موارد باعث مرگ حیوان می شود. آناپلاسما مارجیناله بصورت بیولوژیکی از طریق کنه و با انتقال خون آلوده توسط گزش مگس های خونخوار یا وسایل آلوده بصورت مکانیکی منتقل می شود. در برخی از مناطق انتقال آناپلاسما مارجیناله از طریق جفت نیز به اپیدمیولوژی آناپلاسموزیس گاوی کمک می کند. بر اساس مطالعات اخیر انجام شده در ایران در حدود یک چهارم گاوهای مورد مطالعه از نظر آناپلاسما مارجیناله مثبت ارزیابی شده اند. علی رغم اهمیت جهانی، در ایران هنوز در تشخیص و درمان، این بیماری نادیده گرفته می شود. بعلت ضعف در تشخیص و گزارش بیماری، اطلاعات پایشی در خصوص این بیماری در ایران محدود می باشد. این مقاله با توجه خاص به شیوع بیماری در ایران و جهان، مطالب علمی در خصوص آناپلاسموزیس را مرور کرده است تا به دامپزشکان در تفریق، تشخیص و درمان بیماری کمک نماید.کلیدواژگان: آناپلاسموزیس، آناپلاسما مارجیناله، گاو، کنه
- مقاله کامل
-
صفحات 16-25بیماری سل، بیماری زئونوزی است که به عنوان یکی از مهم ترین بیماری های تهدید کننده انسان و دومین عامل عفونی در انسان می باشد. تمایز گونه های مختلف کمپلکس مایکوباکتریوم توبرکلوزیس به روش های معمول زمان برو از طرفی، تشخیص دقیق جهت درمان به موقع بیماران، نقش حیاتی را ایفا می نماید. لذا هدف از این مطالعه، شناسایی جنس مایکوباکتریوم و تعیین هویت مولکولی مایکوباکتریوم توبرکلوزیس کمپلکس در بیماران استان فارس به وسیله تکنیک های RD typing و PCR-RFLP بود. ژنوم 50 جدایه با استفاده از روش جوشاندن استخراج گردید. برای تعیین جنس این جدایه ها از تکنیک PCR بر اساس قطعه 16S rRNA استفاده گردید. تکنیک PCR IS6110 و تکنیکRD typing نیز به ترتیب برای شناسایی و تعیین هویت باکتری مورد استفاده قرار گرفت. در نهایت، با استفاده از تکنیک های RD typing و PCR-RFLP بر روی ژن oxyR جهت تعیین هویت مایکوباکتریوم /تعیین گونه مایکوباکتریوم انجام شد. تمامی جدایه ها با استفاده از تکنیک PCR برای16S rRNA باند 543 جفت باز را نمایش دادند و با استفاده ازPCR برایIS6110، باند 245 جفت باز را نمایش دادند که مایکوباکتریوم توبرکلوزیس کمپلکس را اثبات کردند. در تعیین هویتRD typing،RD1، RD4، RD9 و RD12 به ترتیب باندهای 146،172،235و 365 شناسایی شدندکه مشخص شد تمامی جدایه های مورد مطالعه گونه توبرکلوزیس می باشند. با استفاده از تکنیک PCR-RFLP روی ژن کاذب oxyR هویت مولکولی RD typing تایید شد. نتایج در این مطالعه نیز نشان دهنده قدرت تکنیک RD typing درتمایز بین مایکوباکتریوم ها می باشد و مشخص گردید تمام جدایه های ارسالی از شیراز، مایکوباکتریوم توبرکلوزیس هستند و مایکوباکتریوم بویس مشاهده نشد. عدم وجود گونه بویس در جدایه های ارسالی از شهر شیراز، نشان دهنده بهداشت مناسب شیر پاستوریزه در این شهر می باشد.کلیدواژگان: کمپلکس مایکوباکتریوم توبرکلوزیس، RD typing، PCR16S rRNA، S6110
-
صفحات 26-33مطالعات پایداری فرآورده های بیولوژیک نقش مهمی در تعیین تغییرات فرآورده در طول مدت زمان نگهداری و همچنین اطمینان از بی ضرری و اثر بخشی واکسن ها دارد. در این پژوهش پایداری طولانی مدت واکسن بروسلوز سویه Rev.1 با دز کاهیده تولید شده در موسسه رازی مورد بررسی قرار گرفت. نمونه برداری طبق رفرانس 2015 OIE بصورت تصادفی انجام شد، نمونه ها پس از نگهداری در دمای 8-2 درجه سانتی گراد و شرایط بسته بندی طبق بروشور واکسن به مدت 11 ماه، به فاصله زمانی یک ماه برای پایداری Real time مورد آزمایش قرار گرفت. در این مطالعه تمامی آزمایش های کنترل کیفی و آزمایش های فیزیکوشیمیایی برای بررسی پایداری Real time این واکسن برای هر 3 بچ متوالی تا 11 ماه پس از تولید انجام شد، برای تجزیه و تحلیل اطلاعات از میانه، میانگین، واریانس، همبستگی و رگرسیون خطی استفاده شد. نتایج حاصل از مطالعه نشان داد که کلیه بچ های مورد مطالعه، پایداری را به مدت10 ماه منطبق با الزامات (OIE2015) دارا می باشند. اگر در شرایطی که تمامی الزامات مربوط به نگهداری واکسن از جمله شرایط زنجیره سرد رعایت شود این واکسن می تواند تا مدت 10 ماه پایداری داشته باشد. لذا طبق الزامات 2015، OIE 2015 BP تاریخ انقضاء این واکسن را از4 ماه به 7 ماه می توان افزایش داد.کلیدواژگان: پایداری، بروسلوز، واکسن Rev، 1
-
صفحات 34-42پروتئین BoLA-DQA، ناحیه ای با چندشکلی بسیار بالا در کلاس MHC-II است که نقش مهمی در پاسخ های ایمنی، حساسیت و مقاومت به بیماری ها، واکسیناسیون و فاکتورهای تولیدی ایفا می کند. در این مقاله جنبه های تغییرپذیری ساختاری و فیلوژنتیک لوکوسBoLA-DQA شناسایی شد. توالی پروتئینی آلل های BoLA-DQA از پایگاه داده ها استخراج گردید. پلات تغییرپذیری برای 60 آلل با استفاده از روش آنتروپی پلات شانون از روی همردیفی توالی با الگوریتم ClustalW2 ترسیم و نواحی بسیار متغیر (HVRs) بررسی شد. سپس با همولوژی مدلینگ تحت تدابیر ویژه ساختارسوم پروتئین به دست آمده، بهینه سازی انرژی و اعتبار سنجی مدل انجام شد. نهایتا فیلوژنی، گروه بندی آللی و تخمین واگرایی تکاملی با استفاده از روش حداکثر درست نمائی انجام گرفت.جهت جستجوی مکاشفه ای درخت اولیه، الگوریتم های Neighbor-Joining و BioNJ برای ماتریکس فاصله جفتی با مدل JTT به کار برده شد. هفت ناحیهHVR و تعدادی نواحی نیمه متغیر در آنالیز تغییر پذیری به دست آمد که متغیرترین، ناحیه آمینواسیدی 93-90 بود. این HVR ها در همه تحت ساختارها پس از همولوژی مدلینگ پروتئین BoLA-DQA (با اعتبار5/97) قابل مشاهده بود. همچنین در آنالیز فیلوژنی، آلل ها در پنج خوشه گروه بندی گردید. ارزیابی تکاملی درخت نشان داد که رده های آللی قدیمی تر2103* و 2602* و جدیدتر احتمالا آلل 1204*، 0302* و 2207* می باشند. دستاوردهای مطالعه حاضر می تواند امر طراحی واکسن علیه بیماری های عفونی را تسهیل و از طریق پیش بینی فاکتورهای تولید بالا در گاو باعث تسهیل انتخاب شود.کلیدواژگان: BoLA-DQA، گاو، MHC، تغییرات، فیلوژنی
-
صفحات 43-52گیاهان دارویی و مشتقات حاصل از آن ها جهت مقابله با مقاومت دارویی به خوبی مورد استفاده قرار گرفته اند. در این تحقیق خواص بیوشیمیایی و ساختار سلولی اشرشیا کلی مقاوم به دارو (ESBL) پس از تاثیر عصاره آلوئه ورا روی آن به کمک میکروسکوپ الکترونی مورد بررسی قرارگرفت. عصاره آبی آلوئه ورا با کمک روش تقطیر تهیه و با روش میکروپلیت دایلوشن، کمترین غلظت بازدارنده از رشد (MIC) روی اشرشیا کلی مقاوم به دارو تعیین گردید. اثر عصاره روی خواص بیوشیمیایی باکتری با استفاده از محیط کشت های مختلف و تست های بیوشیمیایی انجام شد. ارزیابی تغییرات ساختاری اشرشیا کلی مقاوم به دارو در قیاس با شاهد، درغلظت های متوالی عصاره با استفاده از میکروسکوپ نوری، غربال گری شد و اولین غلظت تغییر دهنده ساختار تعیین گردید. سپس در این غلظت، ساختار دقیق اشرشیا کلی مقاوم به دارو و سویه حساس در معرض عصاره در مقایسه با شاهد، با کمک میکروسکوپ الکترونی گذاره با روش های مقطع گیری و رنگ آمیزی منفی بررسی شد. MIC معادل 004/0 میکروگرم بر لیترعصاره آبی برای اشرشیا کلی مقاوم به دارو تعیین گردید. درغلظت کمتراز MIC، تا 30 دقیقه پس ازترکیب عصاره با باکتری نتایج کلیه تست های بیوشیمیایی بدون تغییربود. پس از این زمان، واکنش باکتری درمعرض عصاره به آزمایشات بیوشیمیایی، تغییر یافته و تست های سیترات، اندول، حرکت و OF، منفی و محیط TSI بدون تولید گاز و قلیایی/قلیایی گردید. نتایج میکروسکوپ نوری نشان داد که عصاره باعث کاهش اندازه، کوکوباسیل شدن باکتری، تغییر در رنگ پذیری ونیز انهدام باکتری شده است. مقایسه سلول های مقاوم و حساس در معرض عصاره در رنگ آمیزی منفی میکروسکوپ الکترونی، تغییر در ابعاد، تجمعات وتقسیمات نامتقارن به فرم جوانه زنی را نشان داد. تصاویر حاصل از مقطع گیری، بیانگر تاثیر عصاره در ابعاد باکتری مقاوم به میزان حدود دو برابر حساس، ضخامت بیشتر دیواره باکتری مقاوم نسبت به حساس، اضمحلال دیواره و تغییر فرم سلول بود که در باکتری مقاوم شاهد (عدم مواجهه با عصاره) مشاهده نگردید. در این تحقیق نحوه تاثیرگذاری یک عصاره گیاهی روی باکتری های مقاوم به دارو درقیاس با شاهد تعیین گردید. عصاره آبی آلوئه ورا لیتورالیس باعث تغییرخواص بیوشیمیایی و ساختارسلولی اشرشیا کلی مقاوم به دارو درمقایسه با شاهد می گردد.کلیدواژگان: عصاره آلوئه ورا، اشرشیا کلی، خواص بیوشیمیایی، ساختار سلولی، میکروسکوپ الکترونی
-
صفحات 53-62سپتی سمی هموراژیک، بیماری حاد گاو و گاومیش در کشورهای گرمسیری است که به وسیله کوکوباسیل گرم منفی به نام پاستورلا مولتی سیدا سروتایپ B:2 ایجاد می شود. شواهد آزمایش پیشین بر روی گاو، دال بر سرکوب پاسخ ایمنی پس از چالش بوده و در مطالعه حاضر جهت بررسی مقدماتی یافته مذکور، آزمایش های in-vitro با استفاده از عصاره پاستورلا و سلول ها ی تک هسته ای خون محیطی (PBMC) گاوی طراحی گردید تا آثار احتمالی سرکوب گری جزء یا اجزائی از باکتری بر لنفوسیت های گاوی بررسی شود. از آزمایش سنجش تحریک تکثیر لنفوسیتی به منظور ارزیابی آثار عصاره عاری از سلول (CFE) پاستورلا بر روی PBMC استفاده شد. سپس ماده ConA به کشت سلول های مورد نظر اضافه و پاسخ تکثیری آن ها با استفاده از روش شمارش آشکارسازی به وسیله ارزیابی فعالیت تایمیدین رادیواکتیو استفاده گردید. به علاوه جهت شناسایی اولیه عامل سرکوب گر موجود در عصاره از روش های حرارت دادن، دیالیز، و تهیه پروتئین غشای خارجی (OMP) استفاده گردید. نتایج نشان داد افزودن عصاره CFE با غلظت 50 میکروگرم در میلی لیتر باعث کاهش پنج برابری پاسخ تکثیری سلول های PBMC به ConA می شود. حرارت دادن عصاره CFE در دمای 80 درجه سانتی گراد به مدت پنج دقیقه فعالیت سرکوب گری آن را به طور کامل از بین برد. OMP فعالیت سرکوب گری مشابه با عصاره نشان داد. این مطالعه حاکی از وجود اثر سرکوب گری جزء یا اجزائی از باکتری پاستورلا مولتی سیدا بر پاسخ تکثیری PBMC به ConA بود. این جزء از باکتری دست کم در بخشی از ساختمان پروتئینی است و جزو پروتئین های غشای خارجی است.کلیدواژگان: پاستورلا مولتی سیدا، سپتی سمی هموراژیک، سرکوب، PBMC، گاو
-
صفحات 63-70بیماری بورس عفونی یا گامبورو یک بیماری حاد و فوق العاده مسری است و ویروس آن پاتوژن مهم تضعیف کننده سیستم ایمنی جوجه های گوشتی و تخم گذار در سراسر دنیا است. هدف از این مطالعه بررسی مولکولی سویه های درگیر در موارد کلینیکی بیماری گامبورو در طیور گوشتی استان گیلان بوده است. بر اساس علائم کلینیکی و یافته های کالبدگشائی تعداد چهار گله (10 درصد) از 40 گله ی تحت بررسی مشکوک به بیماری تشخیص داده شد. در نمونه های بورس فابریسیوس هر چهار گله پس از استخراج RNA و انجام آزمایش RT-PCR، یک باند 643 جفت باز در ناحیه بسیار متغیر ژن VP2 تکثیر شد. برای تایید بیشتر RT-PCR هر چهار گله، آزمایشPCR آشیانه ای انجام شد که با استفاده از پرایمر اختصاصی یک باند 552 جفت باز تکثیر و مشاهده شد. برای شناخت حدت ویروس، آزمایش هضم آنزیمی با دو آنزیم SacI و BspMI صورت گرفت و نتایج هضم ثبت گردید. بر اساس نتایج به دست آمده هر چهار گله مبتلا به ویروس فوق حاد بیماری گامبورو vvIBD تشخیص داده شد. نتیجه اینکه در چندسال اخیر علی رغم کاهش موارد حاد کلینیکی بیماری گامبورو، سویه فوق حاد در گله های گوشتی استان گیلان در حال چرخش بوده و مطالعه بعدی شناسائی تحت کلینیکی بیماری گامبورو در سنین پائین توصیه می شود.کلیدواژگان: گامبورو، RT-PCR، Nested-PCR، هضم آنزیمی، طیورگوشتی
-
صفحات 71-77در این مطالعه جداسازی، خالص سازی و غیرفعال نمودن پلی ساکارید باکتری اشرشیا کولی با هدف بررسی اثر لیپوپلی ساکارید (LPS) فعال و غیرفعال در تحریک پاسخ هومورال ماکیان انجام شده است. همچنین امکان استفاده از این قسمت دیواره خارجی در تحریک اختصاصی سیستم ایمنی هومورال نسبت به باکتری منبع آن ارزیابی شده است. جداسازی لیپوپلی ساکارید با استفاده از اتیلن دی آمین تترا استیک اسید (EDTA) انجام شد. چهار دوز از LPS فعال و غیر فعال شامل 10، 25، 50 و 100 میکروگرم به همراه 100 میکرولیتر از گلبول قرمز گوسفند (SRBC) 20 درصد به هشت گروه شامل چهار قطعه مرغ تزریق شد. پاسخ ایمنی هومورال در روزهای 5 و 10 پس از تیمار، با روش معمول هماگلوتیناسیون بررسی شد. اثر LPS در ایجاد پاسخ ایمنی هومورال نسبت به باکتری منبع با روش الیزای خانگی ارزیابی شد. تزریق دوزهای 10 و 25 میکروگرم از لیپوپلی ساکارید باکتری اشرشیا کولی به صورت معناداری (05/0 > p) سبب تحریک پاسخ ایمنی هومورال شد. لیپوپلی ساکارید غیر فعال 10 روز پس از تزریق میزان 100 میکروگرم، سبب افزایش غیر معنادار عیار آنتی بادی شد. همچنین تفاوت معناداری (05/0 > p) در تغییر عیار آنتی بادی نسبت به باکتری اشرشیا کولی در گروه های مختلف وجود نداشت. امکان بهره مندی از لیپوپلی ساکارید باکتری اشرشیا کولی در ایمن سازی ماکیان وجود دارد؛ همچنین بررسی اثرات جانبی و تغییر روش های غیرفعال سازی می تواند زمینه استفاده از LPS را در ایمن سازی حیوانات فراهم کند. علاوه بر این استفاده از LPS اشریشیا کولی قادر به تحریک سیستم ایمنی علیه این باکتری نبود.کلیدواژگان: لیپوپلی ساکارید، اشرشیا کولی، ماکیان، ایمنی هومورال
-
صفحات 78-84ورم پستان یکی از بیماری های مهم گاوهای شیری در سراسر دنیا قلمداد می شود و با کاهش تولید شیر موجب ضرر و زیان اقتصادی زیادی می شود. تولید متابولیت های ثانویه مضر، ایجاد مقاومت ضد میکروبی و بقایای دارو در محصولات دامی در پی درمان ورم پستان با آنتی بیوتیک ها سبب شده تا استفاده از داروهای گیاهی بیشتر مورد توجه قرار گیرد. هدف از این مطالعه ارزیابی برون تنی فعالیت ضدباکتریایی روغن فرار گل و برگ گیاه بومادران بر برخی پاتوژن های عامل ورم پستان گاو در منطقه شهرکرد می باشد. برای این کار روغن فرار بومادران با استفاده از دستگاه کلونجر مطابق با دارونامه بریتانیا تهیه، و ترکیبات تشکیل دهنده آن توسط دستگاه GC/MS اندازه گیری شد. برای ارزیابی اثر ضدمیکروبی آن برروی باکتری های جدا شده از ورم پستان از دو روش انتشار در آگار و رقت سازی سریال استفاده شد. نتایج حاصل از انتشار دیسک نشان داد که روغن فرار بومادران در مقدار mg/mL 5 اثر مهاری بر روی همه باکتری های مورد مطالعه دارد. در روش رقت سازی سریال، میزان MIC روغن فرار بومادران علیه استرپتوکوکوس آگالاکتیه، استرپتوکوکوس دیس گالاکتیه و انتروکوکوس فکالیس 73mg/mL/4 و میزان MBC برابر mg/mL 46/9 بود. برای استافیلوکوکوس اورئوس MIC و MBC به ترتیب mg/mL 365/2 وmg/mL 73/4 بود. بر اساس یافته ها نتیجه گیری می شود که از روغن فرار بومادران می توان به عنوان عاملی برای از بین بردن باکتری های عامل ورم پستان در محیط آزمایشگاهی(In vitro) استفاده کرد.کلیدواژگان: روغن فرار بومادران، استافیلوکوکوس اورئوس، استرپتوکوکوس آگالاکتیه، استرپتوکوکوس دیس گالاکتیه، انتروکوکوس فکالیس
-
صفحات 85-91بروسلوزیس یک بیماری مشترک با گسترش جهانی است که سبب سقط جنین و کاهش باروری در گاو می شود. بروسلوزیس همواره در ایران بروز بالایی دارد. هدف از مطالعه حاضر بررسی شیوع آلودگی به بروسلا آبورتوس در گاو های هلشتاین شمال غرب ایران با استفاده از روش های سرولوژی و PCR بود. در این مطالعه نمونه خون از 1692 راس از گاوهای شیری استان های آذربایجان غربی، آذربایجان شرقی و اردبیل (شمال غرب ایران) جمع آوری و سرم آن ها توسط سانتریفیوژ جدا گردید. نمونه های سرمی برای انجام آزمایش رزبنگال (RBT)، آزمایش 2-ME و روش PCR مورد استفاده قرار گرفت. از تعداد 1692 نمونه جمع آوری شده، 65/14 درصد آزمایش رزبنگال، 23/13 درصد آزمایش 2-ME و 98/21 درصد در آزمایش PCR مثبت بودند. این طور می توان نتیجه گرفت که شیوع بیماری بروسلوز در گاو های شیری این منطقه پایین بوده و از بین تمام تست های کمک تشخیصی، روش های مولکولی نظیر PCR برای تشخیص سویه های بروسلا در گاوهایی که در معرض سقط جنین هستند استفاده شود.کلیدواژگان: بروسلا آبورتوس، سرولوژی، PCR، گاو
-
صفحات 92-96توکسوپلاسموز، عفونت تک یاخته ای است که منجر به ایجاد سقط جنین در حیوانات خون گرم و از جمله در گوسفند می شود. هدف از این مطالعه، بررسی میزان شیوع عفونت ناشی از توکسوپلاسما گوندئی در گوسفندان مناطقی از استان اصفهان بود. به این منظور؛ تعداد 320 نمونه سرمی از جمعیت مذکور تهیه و از نظر وجود پادتن های IGg مربوط به این تک یاخته با روش الایزای غیرمستقیم مورد ارزیابی قرار گرفتند. نتایج بررسی نشان داد 73 مورد از 320 سرم مورد بررسی (81/22 درصد) دارای تیتر سرمی قابل اندازه گیری ضد توکسوپلاسما گوندئی بودند. نمونه های مورد بررسی، بر حسب سن گوسفندان، به پنج گروه طبقه بندی شدند: یک تا 5/1 سال، از 5/1 تا 5/2 سال، از 5/2 تا 5/3 سال، از 5/3 تا 5/4 سال و پیرتر از 5/4 سال. شیوع سرمی ضد تک یاخته مذکور در این نمونه ها بررسی شد و نتایج بررسی به ترتیب نشان دهنده شیوع 66/16، 48/19، 07/22، 77/25 و 49/25 درصد در گروه های مذکور بود. بررسی آماری نشان دهنده ی وجود ارتباط آماری معنی داری بین افزایش سن و افزایش یا کاهش موارد مثبت عفونت نبود (05/0
کلیدواژگان: گوسفند، اصفهان، توکسوپلاسما گونده ای، پلاسما
کلیدواژگان: ماهی طلال، پیکولینات کروم، رشد، هماتولوژی، کلسترول، تری گلیسرید