مقایسه دو تکنیک تکثیر هم دما به واسطه لوپ LAMP و PCR در تشخیص ویروس هپاتیت B

ویروس هپاتیت B (HBV) یکی از عوامل بسیار مهم در پیدایش بیماری های کبدی و هپاتوسلولار کارسینوما می باشد. روش های تشخیص این ویروس (سرولوژیک و مولکولی) هر کدام دارای محدودیت هایی هستند به همین دلیل امکان استفاده از آنها در همه مراکز تشخیصی وجود ندارد. در این تحقیق سعی بر راه اندازی تکنیک نوینLAMP (LAMP -(Loop Mediated Isothermal Amplification با کمک پرایمرهای اختصاصی طراحی شده ویژه ناحیه HBs و مقایسه با PCR برای تشخیص ویروس از نمونه های سرمی شده است.
در این مطالعه 104 نمونه سرمی مثبت با سیستم کوباس، مورد بررسی قرار گرفتند. DNA به روش DNP استخراج شد. پرایمرهای PCR انتخاب و 6 پرایمر ویژه برای تکنیک LAMP طراحی گردید. آزمون های حساسیت و ویژگی بر روی هر دو تست انجام و سپس هر دو آزمون بر روی نمونه ها بهینه گردید. محصول PCR به وسیله الکتروفورز و محصول LAMP بوسیله اضافه کردن سایبر گرین و الکتروفورزیس شناسایی شد.
از 104 نمونه با تعداد پارتیکل مشخص و با تیترهای متفاوت جمع آوری شده، 95 مورد (34/91%) در آزمونPCR این مطالعه مثبت شدند. از این تعداد 101 نمونه (11/97%)LAMP مثبت بودند. 9 نمونه PCR منفی بودند که از این 9 نمونه 6 مورد در تست LAMP مثبت گزارش شدند.
مقایسه کاربرد PCRو LAMP بر روی نمونه های مرضی با تعداد پارتیکل ویروسی مشخص نشان داد که تکنیک تکثیر هم دما به واسطه لوپ (LAMP) دارای حساسیت، ویژگی و به یک بیان دقت بالاتری می باشد.