مطالعه ترمودینامیکی پایانه کربوکسیل نوروتوکسین بوتولینوم تیپ E با روش طیف سنجی دورنگ نمایی دورانی

به منظور پیشگیری از سندروم بوتولیسم، به تازگی محققین به استفاده از واکسن های نوترکیب توجه خاصی نشان داده اند. یکی از این واکسن-ها، پروتئین نوترکیب حاوی 93 اسید آمینه انتهای کربوکسیلی نوروتوکسین بوتولینوم تیپ E (rBoNT/E-HCC) است. در این تحقیق پس از بیان و تخلیصrBoNT/E-HCC، به بررسی اثر pH بر این پروتئین توسط طیف سنجی دورنگ نمایی دورانی (Circular Dichroism، CD) پرداخته شده و به دنبال آن مطالعات ترمودینامیکی به منظور یافتن شرایط بهینه تخلیص و سنجش امکان استفاده از این کاندید، واکسن به صورت خوراکی مورد بررسی قرار گرفته است. بدین منظور واسرشتگی حرارتی rBoNT/E-HCC در چهار pH مختلف (2، 5، 4/7 و9) توسط CD مورد بررسی قرار گرفته است. نتایج نشان داده که Tm و ∆G° پروتئین rBoNT/E-HCC در pHهای بازی نسبت به pH های اسیدی بالا تر است. در نتیجه یافته های این تحقیق، بهترین شرایط تخلیص برای پروتئین rBoNT/E-HCC، شرایط با pH خنثی یا باز می باشد.