جداسازی و ایمنوفنوتایپینگ سلول های اپی تلیالی پرده آمنیون

سلول های اپیتلیال پرده آمنیون (hAECs) جمعیت هتروژنی با توانایی تمایز به سه رده سلولی لایه ژرمینال هستند. هدف این مطالعه بهبود روش-های جداسازی و اینمونوفنوتایپینگ سلو ل های بنیادی تخلیص شده با استفاده از پنلی از آنتی بادی های ضد مارکرهای بنیادی بود.
چهار واحد جفتی از مادرانی که تحت جراحی سزارین انتخابی بوده و هنوز نه ماه بارداری کامل نشده بود تهیه گردید و در شرایط استریل و با حفظ زنجیره سرمایی به آزمایشگاه منتقل شد. پرده آمنیون به صورت مکانیکی از لایه کوریون جدا شده و با استفاده از trypsin- EDTA هضم آنزیمی گردید و سوسپانسیون سلولی به دست آمده جمع آوری شد و پس از چند بار شستشو با استفاده از مارکر اپیتلیالی سایتوکراتین از لحاظ درصد خلوص بررسی گردید. سپس سلو ل های به دست آمده از نظر بیان مارکرهای CD29، CD9، CD34، CD45، CD44، CD133، CD73، CD105، CD38، CD10 MHC-I، MHC-II، HLA-G، SSEA-4، STRO و OCT-4 با استفاده از فلوسایتومتری مورد بررسی قرار گرفت.
تعداد 80-130 میلیون سلول، بسته به کیفیت و اندازه پرده آمنیون از هر واحد جفتی به دست آمد. بیان 90 درصدی مارکر سایتوکراتین نشان دهنده درصد خلوص بالای این سلول ها بود. بررسی فلوسایتومتری سلولها نشان داد این سلول ها از نظر بیان مارکرهای CD9، CD10، CD29، CD73، CD105، HLAI، HLA-G، OCT-4، SSEA-4 و STRO مثبت بوده که نشان دهنده بنیادی بودن این سلول ها می باشد. این سلو لها از نظر بیان مارکرهای CD34، CD38، CD44، CD45، HLA-DR و CD133 منفی بودند.
نتایج حاصل از ایمونوفنوتایپینگ نشان داد که سلول های hAECs مارکرهای زیادی را بیان می کنند که با سلول های بنیادی جنینی مشترک می باشد و به نظر می رسد که بتوان به عنوان منبع جدیدی از سلول های بنیادی در کاربردهای درمانی استفاده شود. واژگان کلیدی: جفت، سلول بنیادی، پرده آمنیون، سلول اپیتلیال.