بررسی قدرت PCR در تشخیص کریپتوسپوریدیوم در کودکان مبتلا به اسهال

روش تشخیص انگل کریپتوسپوریدیوم، تهیه گسترش از مدفوع، رنگ آمیزی ذیل نلسون و مشاهده اووسیست است. تشخیص، توسط این روش نیاز به تعداد بالای اووسیست در هر گرم مدفوع، زمان بیشتر جهت بررسی و مهارت تکنسین دارد، تا کنون در ایران مطالعه ای جهت ارزیابی قدرت روش PCR و رنگ آمیزی ذیل نلسون به عنوان روش استاندارد صورت نگرفته است. لذا در این مطالعه، PPV و NPV روش PCR و روش رنگ آمیزی ذیل نلسون اصلاح شده (MZN) در تشخیص کریپتوسپوریدیوم در کودکان مبتلا به اسهال مراجعه کننده به بیمارستان تعیین گردید.

این مطالعه به روش تشخیصی انجام گرفت. تعداد 2500 نمونه مدفوع از کودکان مبتلا به اسهال گرفته و از آنها گسترش تهیه شد و بعد از رنگ آمیزی ذیل نلسون اصلاح شده (فوشین قلیایی به همراه حرارت، رنگ بر و متیلن بلو) با میکروسکوپ بررسی شدند. بر روی نمونه های مثبت و تعدادی از نمونه های منفی، عمل استخراج DNA انجام شد و توسط روش PCR، آلودگی به کریپتوسپوریدیوم تشخیص داده شد و ارزش اخباری مثبت (PPV) و منفی (NPV) هر دو روش مورد بررسی قرار گرفت.

روش ذیل نلسون اصلاح شده توانست از 2500 نمونه، 30 مورد مثبت تشخیص دهد که همگی آنها توسط روش PCR نیز مثبت اعلام شدند و هیچ مورد مثبت کاذب توسط روش رنگ آمیزی مشاهده نشد. از موارد منفی نیز، 2 مورد مثبت توسط PCR تشخیص داده شد که نشان دهنده منفی کاذب توسط روش رنگ آمیزی بود، PPV و NPV روش رنگ آمیزی به ترتیب 1/94% و100% و PPV و NPV روش PCRنیز 100% اعلام شد.

روش PCR قدرت لازم را در تشخیص کریپتوسپوریدیوم دارد و به عنوان روش تشخیصی دقیق، به ویژه در افراد دارای نقص در سیستم ایمنی، معرفی می شود، اما با توجه به قدت تقریبا بالای روش MZN و در دسترس بودن آن در اکثر آزمایشگاه ها، استفاده از این روش جهت تشخیص در کودکان دارای ایمنی سالم، کافی و مفید به نظر می رسد.