بررسی چندشکلی اگزون دو ژن BoLA-DRB3 در جمعیت گاومیش استان خوزستان با استفاده از روش PCR-RFLP

جایگاه ژنی مجموعه سازگاری بافت (MHC) کد کننده آنتی ژن ها و پروتئین های سطح لوکوسیت ها است که در واکنش های دفاعی بدن و شناسایی پروتئین های خارجی نقش دارند. در گاو این جایگاه ژنی به نام بولا معروف است که در سه دسته ژنی به نام های کلاسІ ، کلاس ІІو کلاس ІІІ  بر روی بازوی کوتاه کروموزوم 23 گاو ترتیب یافته اند، هر یک از این کلاس های ژنی دارای مجموعه جایگاه های ژنی متعدد و مختلف است و هر جایگاه می تواند تا بیش از ده ها آلل را شامل شود . هدف از این پژوهش، بررسی چندشکلی اگزون 2 جایگاه ژنی BoLA-DRB3 در جمعیت گاومیش استان خوزستان است. در این پژوهش از روش پی.سی.آر دو مرحله ای (Heminested-PCR) برای تکثیر این اگزون استفاده شد. خونگیری از 80 راس گاومیش از شهرستان های استان صورت گرفت. واکنش دو مرحله ای زنجیر ه ای پلیمراز جهت  تکثیر قطعه 284 جفت بازی از اگزون 2 ژن MHC با استفاده از آغازگرهای اختصاصی این ژن انجام شد. قطعه تکثیر شده به وسیله آنزیم های برشیIIIHae و RsaІ مورد تیمار قرار گرفت. نتایج حاصل از این پژوهش با استفاده از آنزیم برشیIIIHae، نه الگوی برشی را در این جایگاه ژنی نشان داد که الگوهای برشی  aوb  به ترتیب با فراوانی 34/37 و 23/75 درصد بیشترین فراوانی آللی را به خود اختصاص دادند و 17 ترکیب ژنتیکی شناسایی شد. آنزیم برشی RsaІ، تعداد ده الگوی برشی را نشان داد که الگوهای برشی g وb  به ترتیب با فراوانی 30 و 20 درصد بیشترین فراوانی آللی را به خود اختصاص دادند با استفاده از این آنزیم نیز 17 ترکیب ژنتیک شناسایی شد . آزمون کای مربع نشان داد که جمعیت مورد بررسی، در حالت تعادل هاردی-وینبرگ قرار دارد . در پژوهش حاضر سطح بسیار بالایی از پلی مورفیسم در جمعیت گاومیش استان خوزستان مشاهده شد.