بکارگیری تکنیک Multiplex PCR جهت جداسازی همزمان ژنهای ctxA، ctxB و zot در ویبریو کلرا ایزوله شده از بیماران

سویه های سم زای(Toxogenic) ویبریوکلرا که واجد ژن های ctxA،ctxB و zot هستند، نسبت به سویه های غیرسم زابیماری شدیدتری ایجاد می کنند، بنابراین شناسائی دقیق و سریع سویه های سم زا بسیار حائز اهمیت است. این مطالعه با هدف به کارگیری روش Multiplex PCR برای جداسازی هم زمان ژن های ctxA، ctxB و zot در ویبریو کلرا ایزوله شده از بیماران طراحی گردید.
در این مطالعه 73 سویه بالینی جمع آوری و با آزمایش های سرم شناختی و زیست شیمیایی به عنوان ویبریوکلرای O1 تشخیص داده شدند. در نهایت به منظور شناسایی ژن های ctxA، ctxB وzot از روش Multiplex PCR استفاده شد و سپس نتایج حاصل با نرم افزار آماری SPSS16 مورد تجزیه و تحلیل قرار گرفتند.
برطبق نتایج حاصل از Multiplex PCR، فراوانی ctxA، ctxB و zot به ترتیب (66 نمونه) 90.4 %، (66 نمونه) 90.4 % و(67 نمونه) 91.7 % بود. نتایج ما نشان داد که Multiplex PCR روشی سریع و دقیق برای جداسازی ویبریوکلرا سم زا در نمونه های بالینی است. هم چنین حساسیت این روش برای جداسازی سویه های ویبریوکلرا که واجد ژن های ctxA، ctxB وzot هستند، کمتر از 10 کپی ژن مورد نظر در نمونه است.
در صورتی که پرایمرهای اختصاصی (ژن های هدف ctxA، ctxB وzot) برای تشخیص ویبریوکلرا سم زا به کار برده شود، روش Multiplex PCR یک روش ساده، راحت و نسبتا ارزان برای جداسازی سریع و دقیق ویبریوکلرا سم زا در نمونه های کلینیکی است.