ترانسداکشن لنتی ویروسی میکرو RNAlet-7f منجر به افزایش بیان ژن HNF4a در سلول های بنیادی جدا شده از بافت چربی انسانی می شود

میکروRNA ها، RNA های غیر کد کننده ای است که به عنوان تنظیم کننده چندین فعالیت زیستی مثل متابولیسم، تکثیر و تنظیم سلولی عمل می کند. مطالعات اخیر نشان دهنده پتانسیل بالای این مولکول های کوچک در تمایز سلول های بنیادی به سلول های مشخص است. هدف از مطالعه حاضر ارزیابی اثر let-7f بر بیان ژن عامل هسته ای کبد (HNF4a) و عوامل خاص کبدی از جمله آلبومین، آلفا فیتوپروتئین، سیتوکراتین 18 و سیتوکراتین 19 در سلول های بنیادی جدا شده از بافت چربی انسانی است.
سلول های بنیادی جدا شده از بافت چربی تحت تاثیر آنزیم کلاژناز نوع I از بافت چربی انسانی استخراج شده و سپس با استفاده از لنتی ویروس های حاوی مهار کننده let-7f و Scramble (کنترل منفی) ترانسداکت شدند. سپس تغییر در سطح بیان ژن های HNF4a، آلبومین، آلفا فیتوپروتئین، سیتوکراتین 18 و سیتوکراتین 19 در زمان های متفاوت با استفاده از روش Real-time PCR بررسی شد.
کارآیی ترانسداکشن ناقل های لنتی ویروسی در سلول های بنیادی جدا شده از بافت چربی انسانی بیش از 80 درصد بود که با بررسی بیان پروتئین فلورسانت سبز ارزیابی شد. نتایج Real-time PCR نشان داد که مهار let-7f در سلول های بنیادی جدا شده از بافت چربی انسانی منجر به افزایش معنی دار در بیان ژن های خاص کبدی در مقایسه با کنترل منفی می شود. همچنین بیان ژن HNF4a روز چهاردهم بعد از ترانسداکشن افزایش داشت که تایید کننده سرکوب ژن HNF4a توسط let-7f است.
نتایج این تحقیق نشان داد که let-7f به عنوان یک تنظیم کننده منفی در بیان ژن HNF4a عمل می کند و مهار let-7f منجر به افزایش بیان نشانگرهای ویژه کبدی می شود. بنابراین مهار let-7f می تواند ابزار موثری در به راه اندازی تمایز سلول های بنیادی جدا شده از بافت چربی انسانی به سمت رده هپاتوسیتی باشد.