اعتبارسنجی روشی سریع و ساده برای تعیین فعالیت آنزیم پروتئاز با روش انتشار

در بررسی برخی محلول های بیولوژیکی گاهی لازم است تا فعالیت آنزیم پروتئاز در آن محلول تعیین شود. بیشتر روش هایی که تاکنون پیشنهاد شده اند بر مبنای تجزیه یک نوع پروتئین و تعیین فرآورده نهایی تجزیه که اسید آمینه می باشد، استوار است. در این پژوهش اعتبارسنجی یک روش ساده و به نسبت سریع برای تعیین فعالیت پروتئاز محلول های مورد نظر بررسی شده است. در این روش اساس کار بر مبنای تجزیه پروتئین موجود در شیر با آنزیم موجود در ماده مورد نظر است. با هیدرولیز پروتئین شیر در مدیای تحت آزمون، محیط مدیا کدورت خود را از دست داده و رنگ مدیا به صورت شفاف درمی آید و بسته به فعالیت آنزیمی پروتئاز، آنزیم در محیط انتشار یافته و براساس درجه انتشار آنزیم می توان به فعالیت آنزیمی آن محلول پی برد. بر طبق روشی که شرح مختصر آن داده شد، فعالیت آنزیم پروتئاز در عصاره میوه کیوی به عنوان منبع گیاهی حاوی فعالیت پروتئازی و چندین محلول بیولوژیکی شامل مایع شکمبه بره بالغ، میش و گاو شیری نیز تعیین شدند. هرچند این روش یک روش کیفی است اما با استفاده از شاخصی که در متن توضیح داده شده است مشخص شد که این شاخص، همبستگی مثبت (926 /0 = r) و معنی داری (008 /0 = P) با فعالیت پروتئولایتیکی به دست آمده از روش مرسوم دارد که استفاده آن را در شرایطی که به دقت زیاد نیاز نیست، قابل توصیه می کند.