کلونینگ و بیان ژن VP28 از یک جدایه ویروس لکه سفید ایران در باکتری E.Coli سویه TG1

ویروس لکه ی سفید عامل بیماری زای مهمی در میگوهای خانواده ی پنائیده است که در چند سال گذشته تلفات قابل توجهی را در میگوهای پرورشی ایران ایجاد کرده است. مطالعات لازم در خصوص ساخت کیت های تشخیص سریع و ایجاد مقاومت در برابر ویروس محلی با استفاده از پروتئین های مختلف غشاء و کپسید ویروس ضروری به نظر می رسد. در راستای این هدف، در این مطالعه، قطعه ای از ژن VP28 ویروس لکه سفید (جدایه ی ایرانی) با طول bp 528 از میگوهای پرورشی آلوده به ویروس در چوئبده آبادان جداسازی و با روش PCR تکثیر داده شد، سپس ژن مذکور در پلاسمید pMal-c2X کلون گردید و پروتئین مورد نظر در باکتری اشریشیاکلی سویه TG1 بیان گردید. بررسی نتایج SDS-PAGE وجود پروتئین بیان شده VP28 با وزن KDa 36/19 را تایید نمود. مشاهده ی پروتئین مذکور با وزن مولکولی قابل انتظار در SDS-PAGE و بررسی توالی ژن کلون شده نشان دهنده ی بیان موفق این پروتئین در باکتری اشریشیاکلی TG1 بود. در این تحقیق، ژن VP28 برای اولین بار از یک جدایه ویروس ایرانی جداسازی و پروتئین آن در یک سیستم بیانی پروکاریوتی بیان شده است.