افزایش ارتفاع و سطح برگ گیاهان تراریخت توتون بیان کننده ژن AtEXPA18 آرابیدوپسیس تالیانا

اکپنسین ها گروهی از پروتئین های دیواره سلولی اند که به واسطه تغییرات pH، موجب بسط دیواره سلولی می شوند. این پروتئین ها از طریق سست کردن پیوندهای هیدروژنی بین میکروفیبریل های سلولز و پلیمر ماتریکس موجب تغییر شکل دیواره و رشد می شوند. در این تحقیق، یک ژن اختصاصی ریشه از گیاه آرابیدوپسیس به نام AtEXPA18 که به طور مستقیم در شکل گیری ریشه های مویین موثر است، همچنین نقش آن در دیگر بخش های گیاهی ثابت شده است، جداسازی و تحت کنترل پیشبرنده CaMV 35S و خاتمه دهنده NOS درون ناقل بیان گیاهی pBI121 همسانه سازی و در نهایت به آگروباکتری منتقل شد. سپس این ژن طی روش تراریختی برگی توتون، به این گیاه انتقال یافت. گیاهان حاصل از باززایی روی محیط انتخابی حاوی کانامایسین گزینش شدند. گیاهان به دست آمده از این طریق در نهایت به گلخانه انتقال یافتند و پس از رشد کافی مورد آنالیز مولکولی و مورفولوژیکی قرار گرفتند. برای اثبات تراریختی گیاهان در سطح ژنوم، استخراج دی ان ای صورت گرفت و ژن AtEXPA18 با استفاده از آغازگرهای اختصاصی طراحی شده و از طریق واکنش زنجیره ای پلی مراز تکثیر شد. همچنین پس از استخراج RNA و ساخت cDNA، نتایج آزمون RT-PCR، رونویسی تراژن را در گیاهان تراریخت تایید کرد. بررسی های مورفولوژیکی گیاهان تراریخت نشان داد که این گیاهان نسبت به گیاهان غیرتراریخت دارای اندام های بزرگ تر و حجیم تری هستند. برای مثال صفاتی همچون ارتفاع بوته و سطح برگ ها، در توتون های تراریخت نسبت به گیاهان شاهد، برتری معنی داری داشتند. نتایج به دست آمده به همراه سایر نتایج، نقش ژن مذکور را در بسط و توسعه سلولی نشان می دهند و آن را به عنوان تنظیم کننده رشد عمومی، برای به دست آوردن گیاهان تراریخته با اندام بزرگ تر توصیه می کنند.