بررسی میزان بیان تعدادی از ژن های دخیل در سرطان در چند رده سلول سرطانی مختلف به روش RT-PCR

فرم تغییریافته و یا جهش یافته ژن ها یا همان پروتو انکوژن ها، مسئول ترویج رشد و تکثیر کنترل نشده سلولی می باشند. تجمع جهش در ژن های مختلف و خاص، در طول زمان منجر به سرطان می شود. الگوی بیان ژن (امضا مولکولی)، برای هر کلاس از سلول های توموری اختصاصی است. این مقاله آخرین روش نظارت بر بیان یک پانل از ژن های خاص سرطانی را شرح می دهد. روش real-time PCR براساس عملکرد کمی رنگ SYBR GReen، به طور وسیعی برای پروفایل ژن استفاده می شود. این روش آسان و مقرون به صرفه است و تنها بر روی ژن های مورد نظر تمرکز می کند. در این مطالعه میزان بیان ژن های موردنظر ما در پنج رده سلول های سرطانی انسانی به طور کمی اندازه گیری شد. ما ژن بتا-اکتین را به عنوان ژن مرجع در نظر گرفتیم. سلول ها لیز شدند و mRNA با استفاده از کیت RNA Purification و ستون هایspin QIAGEN RNeasy استخراج گردید. رشته اول cDNA با استفاده از کیتHigh capacity cDNA Reverse transcription سنتز و میزان بیان ژن ها به وسیله دستگاهreal-timePCR AB step one plus اندازه گیری شد.به طور خلاصه بیان ژن p53 در هر دو رده سلول سرطان پستان، MCF7 و T47-D و سرطان ریه، A549 بالا بود. بیان src در رده سرطان پروستات، PC3 بالاتر بود. همین طور SKOV3 (سرطان تخمدان) بیان بالای ژن HER-2 را نشان داد. نتایج به وضوح نشان می دهد که الگوی بیان این پانل از ژن ها، در هر رده سلولی تقریبا منحصر به فرد است.