تشخیص همزمان سل ریوی و تعیین مقاومت داروئی به ایزونیازید در سویه های کلینیکی مایکوباکتریوم توبرکلوزیس با استفاده از روش PCR-RFLP

تشخیص سریع و درمان دارویی مناسب اولین اقدام برای کنترل اپیدمی سل و سل مقاوم به دارو است. در مطالعه حاضر روش مولکولی PCR-RFLP جهت تشخیص سریع سویه های کلینیکی و تعیین مقاومت آن به ایزونیازید مورد استفاده قرار گرفت. در مطالعه حاضر تعداد 87 نمونه کلینیکی مایکوباکتریوم توبرکلوزیس مورد بررسی قرار گرفت. ابتدا با کمک PCR جستجو و تکثیر ژن katG قطعه bp620 برای تایید مولکولی در تشخیص باکتری صورت گرفت. سپس محصول PCR با کمک RFLP و با استفاده از آنزیم مناسب برش داده شده و الگوهای به دست آمده در الکتروفورز، به منظور تشخیص موتاسیون در 315 katG مورد بررسی قرار گرفت. جهت تایید نهایی، تعدادی از نمونه ها تعیین توالی شدند. در مطالعه حاضر تمامی سویه های مورد مطالعه باند bp620 را نشان دادند که موید مایکوباکتریوم توبرکلوزیس بود. علاوه بر این، از 46 سویه مقاوم به ایزونیازید، در روش RFLP-PCR نشان داده شد که 44 سویه دارای موتاسیون در Ser315Thr ژن katG بودند. از 41 سویه حساس هیچ کدام در کدون 315 katG موتاسیون نداشتند. از طرفی نتایج تعیین توالی، تایید کننده ی تعیین موتاسیون به روش مولکولی مورد استفاده بود. در این تحقیق برای تست RFLP-PCR حساسیت 6/95 درصد (98/0-85/0:CI 95 درصد) و ویژگی 100 درصد (1/0-91/0:CI 95 درصد) محاسبه گردید. نتایج مطالعه حاضر نشان می دهد که روش PCR-RFLP قادر به شناسایی مقاومت به ایزونیازید در 95 درصد موارد بوده و می تواند در یک آزمایش به صورت همزمان جهت تشخیص سل ریوی و تعیین مقاومت داروئی به ایزونیازید در سویه های کلینیکی مایکوباکتریوم توبرکلوزیس مورد استفاده قرار گیرد.