بررسی کارایی عملکرد آنتی ژن نوترکیب ROP1 در تشخیص عفونت توکسوپلاسما گوندی

توکسوپلاسمایک انگل داخل سلولی اجباری است که دارای دامنه میزبان وسیعی در میان پستانداران و پرندگان است، پروتئین های توکسوپلاسما آنتی ژن های قوی می باشند که قادرند واکنش های ایمنی قوی را شروع کنند.یکی از این نوع راپتری پروتئین 1 توکسوپلاسما گوندیی(ROP1) است.ROP1 یکی از رقابت کننده های واکسن های نوترکیب بر علیه توکسوپلاسما می باشد. بنابراین هدف از این مطالعه کلونینگ و بیان ROP1 در یک کلونینگ وکتور((PUET1 و ساخت این آنتی ژن نوترکیب برای استفاده های بعدی است.
پس از استخراج DNA و تکثیر با روش PCR محصول در کلونینگ وکتورPUET1 در مکان آنزیم های محدودکننده BamH1 و EcoR1کلون شد و به داخل سلول میزبان BL21plsS انتقال یافت. همچنین جهت ایجادوکتور یوکاریوتی،pcROP1 در pcDNA3 در مکان های Hind111 و EcoR1 ساب کلون شد و نتایج با هضم آنزیمی و توالی یابی بررسی شد. حال این آنتی ژن نوترکیب با IgM و IgGELISA پوشانده شد.
یک قطعه 757 جفت بازی جداسازی شد و آنالیز توالی یک همولوژی در حد 96 درصد را با توالی ژن در سایت No. M71274.)Gene Bank)نشان داد.نتایج الایزا نشان داد IgMELISA ROP1 با بیشترین تعداد نمونه های IgM مثبت واکنش می دهد.
آنتی ژن نوترکیب ROP1 در یک تست IgM Rec-ELISA می تواند جایگزین آنتی ژن تاکی زوئیت در تست های سرولوژیکی IgM و IgG شود.