جهش القایی در ژن کنترل کننده فعالیت هسته یخ با جهش زای EMS در دو جدایه از باکتری شبه Pseudomonas viridiflava

باکتری های مولد هسته یخی با افزایش جمعیت و فعالیت خود باعث سرمازدگی گیاهان در دماهای بالاتر از معمول می شوند. اساس ژنتیکی هسته های یخی باکتریایی به صورت تک ژن کروموزومی ina(Ice nucleation active) میباشد. برای ایجاد جهش در ژن ina، باکتری شبه Pseudomonas viridiflava از ماده EMS در دو غلظت 20 و 25 میکرولیتر در میلی لیتر استفاده شد. جهت ردیابی ژن ina در جدایه های شبه P. viridiflava از روش واکنش زنجیره ای پلی مراز با یک جفت آغازگر اختصاصی ژن ina که از روی نواحی حفظ شده ژن هسته یخ در چندین گونه باکتری مولد هسته یخی، طراحی شد، استفاده شد. فعالیت هسته یخ با آزمون انجماد قطره ای ارزیابی شد. برای بررسی از دست رفتن فعالیت هسته یخی، سوسپانسیون حاوی 107 سلول در میلی لیتر هر جهش یافته بر روی گیاهچه-های پرتقال پاشیده شده و از گیاهچه تیمار شده با آب مقطر استریل به عنوان شاهد منفی استفاده شد. گیاهان به مدت 7 تا 10 ساعت در دمای 10- درجه سانتی گراد نگهداری شدند و سپس به گلخانه برگردانده شدند. تعدادی از جهش یافته های به دست آمده در گیاهچه ها ایجاد یخ زدگی نکردند.