افزایش کارآیی تراریختی بواسطه آگروباکتریوم در جنین نارس گندم رقم آریا

روش کارآمد تراریختی بواسطه آگروباکتریوم از طریق استفاده از زمان های مختلف امواج فراصوت، سویه های آگروباکتریوم، نوع محیط تلقیح و غلظت های مختلف استوسرینگون در رقم آریا گندم تهیه گردید. از ریزنمونه جنین نارس برای تلقیح با باکتری آگروباکتریوم تومه فاسینس حاوی پلاسمید نوترکیب pBI121 استفاده شد. بین زمان های مختلف استفاده از امواج فراصوت بیشترین درصد جنین های نارس GUS مثبت (14/1 ± 58/54 درصد) و تراریختی (07/0 ± 78/0 درصد) در 10 ثانیه امواج فراصوت مشاهده گردید. بین سویه های آگروباکتریوم، بیشترین بیان موقت و پایدار ژن GUS با میانگین 55/1 ± 50/62 درصد و 04/0 ± 39/0 درصد در سویه LBA4404 بود. بین انواع مختلف محیط تلقیح، بیشترین جنین های نارس GUS مثبت و تراریختی (به ترتیب 14/0 ± 86/1 درصد و 04/0 ± 75/0 درصد) با کاربرد محیط تلقیح IM مشاهده شد. بین غلظت های استوسرینگون، بیشترین تراریختی با میانگین 04/0 ± 75/0 درصد با کاربرد 200 میکرومولار استوسرینگون بدست آمد. همچنین، مطالعه اثرات کاربرد همزمان نشان داد که بیشترین کارآیی تراریختی (06/0 ± 56/1 درصد) در جنین های نارس تلقیح شده با سویه LBA4404 پس از 10 ثانیه تیمار امواج فراصوت، جنین های نارس تلیقح شده با آگروباکتریوم در محیط تلقیح IM پس از 10 ثانیه امواج فراصوت و جنین های نارس تلقیح شده با آگروباکتریوم در محیط تلقیح حاوی 200 میکرومولار استوسرینگون پس از 10 ثانیه امواج فراصوت حاصل می شود.