بیان فاکتورهای اصلی نوترکیب EspA-Intimin از باکتری E. coli O157:H7 در گیاه تنباکو به منظور تولید واکسن خوراکی
نویسنده:
چکیده:
یکی از پاتوژن های مهم ایجاد کننده کولیت هموراژیک و نشانگان همولیتیک اورمیک در انسان باکتری اشرشیاکلی هموراژیک سویه O157H7 می باشد. دام ها اصلی ترین مخزن این باکتری می باشند. دو فاکتور پروتئینی با اهمیت در کلونیزاسیون باکتری در اپیتلیوم روده EspA و Intimin هستند که باعث ایجاد آسیب های تخریبی به واسطه اتصال می گردند. این پروتئین ها توسط جزایر بیماری زایی LEE (Locus of Enterocyte Effacement) کد می شوند. EspA بخشی از سیستم ترشحی نوع III می-باشد که موجب انتقال پروتئین Tir به سلول میزبان و ورود آن به غشا سلول می شود. اینتیمین توسط ژن eae کد شده و به Tir متصل می گردد. این تحقیق بر این اساس است که ژن کایمریک و نوترکیب EI شامل EspA و Intimin که به واسطه یک لینکر به یکدیگر اتصال یافته اند می تواند به عنوان کاندیدای ایمنی زایی خوراکی در نظر گرفته شود و موجب کاهش کلونیزاسیون O157:H E. coli در مدل حیوانی گردد. بدین منظور ژن سنتتیک EspA (120) و Intimin (282) که توسط توالی 4(EAAAK) به یکدیگر متصل شده بود ساخته شد. ژن ساخته شده بر اساس کدون های گیاه توتون بهینه سازی و سپس تحت کنترل پروموتر Camv35s در ناقل بیانی گیاه کلون و پس از آن به واسطه انتقال توسط آگروباکتریوم به گیاه توتون منتقل گردید. ورود ساختار ژنی نوترکیب در برگ های گیاه توتون توسط آزمون PCR تایید شد. در مرحله بعد بیان ژن مورد نظر به روش RT-PCR بررسی و تایید گردید. در نهایت میزان پروتئین EI در برگ های توتون تراریخته توسط روش الیزا تخمین زده شد که برابر با 1/0 درصد از کل پروتئین محلول در برگ گیاه بود.
کلیدواژگان:
EspA ، Intimin ، گیاه تراریخت ، E ، coli O157:H7 ، واکسن خوراکی
زبان:
فارسی
در صفحه:
77
لینک کوتاه:
magiran.com/p1567859
دانلود و مطالعه متن این مقاله با یکی از روشهای زیر امکان پذیر است:
اشتراک شخصی
با عضویت و پرداخت آنلاین حق اشتراک یکساله به مبلغ 1,390,000ريال میتوانید 70 عنوان مطلب دانلود کنید!
اشتراک سازمانی
به کتابخانه دانشگاه یا محل کار خود پیشنهاد کنید تا اشتراک سازمانی این پایگاه را برای دسترسی نامحدود همه کاربران به متن مطالب تهیه نمایند!
توجه!
- حق عضویت دریافتی صرف حمایت از نشریات عضو و نگهداری، تکمیل و توسعه مگیران میشود.
- پرداخت حق اشتراک و دانلود مقالات اجازه بازنشر آن در سایر رسانههای چاپی و دیجیتال را به کاربر نمیدهد.
In order to view content subscription is required
Personal subscription
Subscribe magiran.com for 70 € euros via PayPal and download 70 articles during a year.
Organization subscription
Please contact us to subscribe your university or library for unlimited access!