شناسایی مولکولی قارچ های تولید کننده 8-کتو تریکوتسین همراه با بذر روناس و ردیابی ژن های سنتزکننده دی اکسی نیوالنول در آنها با استفاده از PCR

روناس (Rubia tinctorum) یکی از محصولات مهم زراعی با مصارف دارویی و صنعتی در استان یزد می باشد. به منظور شناسایی قارچ های همراه با بذور روناس و تولید کننده توکسین، طی سال های زراعی 91 لغایت 93 از بذور روناس در مناطق مهم کاشت آن در استان یزد شامل اردکان و بافق نمونه برداری به عمل آمد. پس از کشت و خالص سازی جدایه های قارچی در محیط های کشت های سیب زمینی دکستروز آگار (PDA) و برگ میخک آگار (CLA)، شناسایی تکمیلی با آغازگرهای اختصاصی هر گونه با استفاده از واکنش زنجیره ای پلیمراز صورت گرفت. ردیابی قارچ های دارای پتانسیل تولید مایکوتوکسین 8-کتوتریکوتسین از جمله دی اکسی نیوالنول (DON) از طریق آغازگرهای اختصاصی ژن Tri13 انجام شد. جهت تایید پتانسیل تولید مایکوتوکسین DON در جدایه های فوزاریوم از کروماتوگرافی مایع با کارایی بالا (HPLC) استفاده شد. در مجموع 249 جدایه قارچی از بذور روناس جداسازی شد که متعلق به شش جنس قارچی شامل فوزاریوم، آسپرژیلوس، پنیسلیوم، آلترناریا، رایزوکتونیا و رایزوپوس بودند که بیشترین فراوانی قارچ های جداسازی شده مربوط به فوزاریوم با 71 درصد کل جدایه ها بود. در بین قارچ های فوزاریوم، گونه های F.solani (55 جدایه) و F.oxysporum (41 جدایه) بیشترین فراوانی را داشتند. گونه های F. poae، F. semitectum و F. equiseti توانایی تولید دی اکسی نیوالنول را دارا بودند. ژن Tri13موثر در تولید دی اکسی نیوالنول نیز در این سه گونه ردیابی گردید و در آزمایش HPLCهمه قارچ های فوزاریوم مورد بررسی پتانسیل تولید مایکوتوکسین مورد نظر را داشتند.