استخراج و تخلیص لیپوپلی ساکارید سالمونلا اینتریتیدیس و ارزیابی فعالیت تب زایی در خرگوش

باکتری سالمونلا جزو خانواده آنتروباکتریاسه و باسیل های گرم منفی تاژه دار است که اکثر‬ ‫سروتیپ های آن توانایی حرکت دارند. لیپوپلی ساکارید (‪ ،(LPS‬عامل اصلی تعیین کننده ویرولانس باکتری است که‬ ‫با اتصال به سطح سلول پیوند شده و فقط در هنگام لیز شدن باکتری آزاد می شود، به آن اندوتوکسین نیز می‬ ‫گویند. هدف از این مطالعه استخراج ‪  LPS‬با روش متانول کلروفرم و آزمایش تب زایی این ترکیب در خرگوش‬ ‫میباشد.
‬ ‫

استخراج LPS‬ از باکتری سالمونلا اینتریتیدیس به روش متانول - کلروفرم انجام گردید. طی فرآیند‬ ‫استخراج سه لایه تشکیل گردید: لایه رویی حاوی ترکیب LPS‬ در متانول، لایه وسطی حاوی سلولهای تخریب شده‬ ‫در آب، و لایه سوم حاوی ترکیبات چربی در کلروفرم بود. سپس لایه های حاوی متانول و کلروفرم به لوله دیگری‬ ‫منتقل شده و در زیر هود تبخیر گردید. آنچه باقی ماند، LPS‬ استخراج شده باکتری بود. خلوص ترکیب استخراج‬ ‫شده با LPS‬ استاندارد در ژل 12% آگارز الکتروفورز گردید و با رنگ آمیزی نیترات نقره بررسی شد. نهایتا میزان‬ ‫تب زایی LPS‬ استخراج شده در خرگوش مورد بررسی قرار گرفت.‬
‫

بررسی باندهای الکتروفورز شده نمونه LPS‬ استخراج شده خلوص مشابهی با نمونه استاندارد را نشان‬ ‫داد. در ضمن تب زایی 0.6 درجه در خرگوش ایجاد نمود.‬ ‫

نتایج بدست آمده از این تحقیق نشان داد روش استخراج متانل - کلروفرم قادر به استخراج ‪  LPS‬با‬ ‫درجه خلوص مشابه LPS‬ استاندارد می باشد. پیروژن بودن ترکیب استخراج شده حاکی از حفظ ساختار و عملکرد‬ ‫آن می باشد.‬