مقایسه برخی از فاکتورهای حدت اشریشیا کلی انتروتوکسیژنیک 99K با دو روش PCR و SDS-PAGE

اسهال ناشی از اشریشیاکلی 99K در گوساله ها به ویژه در نخستین روزهای پس از تولد، به علت تلفات و خسارات اقتصادی حاصله از اهمیت زیادی برخوردار است. در این مطالعه شیوع ژن های عوامل بیماریزایی اشریشیاکلی 99 K  با استفاده از تکنیک Multiplex PCR و سپس الگوی پروتیینی این باکتری ها با روش های مختلف بید، اوره و پودر شیشه با SDS- PAGE ارزیابی گردید.

300 سواب رکتوم از گوساله های 1 تا 30 روزه  مبتلا  به  اسهال  طی سال های 1390-1389 جمع آوری شد. یک بخش جهت انجام Multiplex PCR برای شناسایی ژن های عوامل بیماریزایی 99K، 41F و STa  استفاده گردید و بخش دیگر جهت کشت بر روی محیط های مختلف جهت جداسازی اشریشیا کلی و  SDS-PAGE مورد استفاده قرار گرفت.

نتایج PCR نشان داد از 200 اشریشیاکلی جداشده، 16مورد دارای ژن های عوامل بیماریزایی 99K، 41 Fو STa    می باشند و در هیچکدام از نمونه های جدا شده از گوساله ها سم حساس به حرارت  LT))وجود نداشت. همچنین نتایج حاصل از SDS-PAGE نشان داد که الگوهای پروتیینی باکتری های مختلف اشریشیا کلی متفاوت می باشد. نتایج SDS-PAGE حاصل از ستون بیانگر وجود تنها یک باند مربوط به آنتی ژن 99K بود.

مشاهده فاکتورهای حدت باکتری های اشریشیا کلی 99K جدا شده نشان داد که همه باکتری ها حداقل دارای سه ژن 99K، 41F و  Staمی باشند. با وجود این که از نظر مولکولی تفاوت معنی داری در بین نمونه ها مشاهده نشد. اما از نظر الگوی پروتیینی تفاوت های قابل ملاحظه ای در بین باکتری های جدا شده وجود داشت. بنابر این می توان نتیجه گرفت که باکتری های متفاوت الگوهای پروتیینی مختلف و در نتیجه بیماریزایی متفاوتی دارند.