ارزیابی اثرات سایتوتوکسیک و آپوپتوتیک سیمواستاتین در رده سلولی سرطان استخوان MG63

سرطان عبارت است از ناهماهنگی میان رشد و مرگ سلول ها که نتیجه آن انباشته شدن تعداد بیش از حد سلول ها است. سرطان استخوان یک نوع بسیار جدی از سرطان است و زمانی اتفاق می افتد که سلول های استخوان ساز دچار مشکل شوند. علی رغم برخی گزارش ها در مورد اثرات ضد سرطانی سیمواستاتین ، فعالیت سیمواستاتین روی سلول های سرطان استخوان گزارش نشده است. هدف از این مطالعه بررسی اثرات سایتوتوکسیک و آپوپتوتیک سیمواستاتین در رده سلولی سرطان استخوان MG63  بود.

در این پژوهش سلول های MG63 کشت داده شدند و سپس سلول ها با غلطت های مختلف سیمواستاتین به مدت 24 ساعت انکوبه شدند و دوز IC50 با استفاده از آزمون (MTT) اندازه گیری شد.اثرات سیمواستاتین بر روی مکانیزم های مرگ سلولی مانند آپوپتوز و نکروز به وسیله ی فلوسایتومتری مورد ارزیابی قرار گرفت. از تست Real-time PCR برای بررسی بیان ژن آنزیم های کاسپاز 3، 8و9 استفاده شد و در آخر سلول های تیمار شده با دوز IC50 سیمواستاتین با تکنیک رنگ آمیزی هوخست مورد بررسی قرار گرفتند. داده های جمع آوری شد با استفاده از آزمون آماری Student’s T و سپس نرم افزار SPSS تجزیه و تحلیل شدند.

نتایج آزمون MTT نشان داد که سیمواستاتین در دوز 155 میکروگرم بر میلی لیتر 50 درصد سلول های سرطانی (IC50) را از بین برد. از طرفی ارزیابی فلوسایتومتری نشان داد که سلول های MG63 تیمار شده با سیمواستاتین (دوز 300 میکروگرم بر میلی لیتر) بیش از 90 درصد نسبت به گروه کنترل دچار مرگ سلولی از نوع آپاپتوز شدند. بررسی آنزیم های کاسپاز 3 ، 8 و 9 با استفاده از تکنیک Real-time PCR نشان داد که بیان ژن های کاسپاز 3 و 9 اختلاف معناداری داشت (p<0.001) اما در مورد بیان ژن کاسپاز 8 اختلاف معناداری مشاهده نشد (P<0.05). در تکنیک رنگ آمیزی هوخست تغییر رنگ سلول های گروه تیمار نسبت به گروه کنترل، حاکی از متراکم و متلاشی شدن هسته ی سلول بود که این موضوع بیانگر مرگ سلولی از نوع آپاپتوز بود.

در نهایت نتایج بدست آمده از این پژوهش نشان داد که داروی سیمواستاتین در محیط کشت سلولی می تواند موجب اثرات سایتوتوکسیک و آپوپتوتیک در سلول های سرطان استخوان MG63 شود که بر این اساس، بررسی احتمال کاربرد داروی سیمواستاتین در درمان سرطان استخوان حایز اهمیت است.