شناسایی ترکیبی مولکولی و بیوشیمیایی آلفاتوکسین کلستریدیوم نویی بومی جدا شده از کبد گوسفند

کلستریدیوم نوویی عامل بیماری کشنده هپاتیت عفونی نکروزان در گوسفند و ندرتا در سایر حیوانات می باشد. بارزترین فاکتور بیماریزایی آن آلفا توکسین (α-توکسین) است که توسط نوع B تولید می شود. خسارات اقتصادی بیماری شامل هزینه های مرگ و میر گوسفندان، استهلاک مزارع درگیر و مشکلات بهداشتی لاشه های آلوده است. تشخیص بیماری های کلستریدیایی و جداسازی عامل بیماری با روش های مرسوم وقت گیر می باشد، لذا نیاز به یک روش ساده و سریع برای جداسازی و تشخیص کلستریدیاهای پاتوژنیک می باشد. بنابراین، هدف از مطالعه حاضر، شناسایی ملکولی توکسین آلفا در جدایه های بومی کلستریدیوم نوویی از کبد گوسفند است. در این مطالعه، از تعداد 75 نمونه کبد، مشکوک به بیماری قانقاریای عفونی کبد جمع آوری شد. نمونه های کبد در شرایط بی هوازی کشت داده شدند. تعدادی از کلنی های کشت داده شده برای تست های بیوشیمیایی مورد استفاده قرار گرفتند. برای تایید مولکولی،DNA جدایه ها استخراج شد و جدایه های بافت کبد و نمونه های کشت شده با واکنش زنجیره ای پلیمراز (PCR) و با استفاده از آغازگرهای اختصاصی α-توکسین، از نظر مولکولی بررسی شدند. با انجام PCR برای α-توکسین، باندی در محدوده 609 جفت باز ایجاد گردید و مشخص شد که نمونه های مورد بررسی به کلستریدیوم نوویی تعلق دارند. براساس نتایج، از 75 جدایه، 18 جدایه به عنوان کلستریدیوم نوویی تایید ملکولی شدند کلستریدیوم نوویی نوع B از کبد جدا شد و با خصوصیات بیوشیمیایی و مولکولی تایید شد. روش PCR ابزاری حساس و خاص است که تشخیص کلستریدیوم نوویی در نمونه ها را تضمین می کند.