بررسی بیان ژن MYH7 در بافت های ران، دست و راسته بره های پرواری نژاد کرمانی

ماهیچه های اسکلتی حدود 40 درصد وزن بدن را تشکیل می دهند و عملکردهای زیادی، مانند حفظ انرژی مورد نیاز، حفظ وضعیت بدنی و محافظت از بافت های نرم را به عهده دارند. رشد طبیعی ماهیچه های اسکلتی پیش نیاز حیوانات برای حفظ فعالیت های طبیعی زندگی و متابولیسم است و هر گونه رشد غیر طبیعی ماهیچه ها منجر به بیماری می شود. بر اساس تجزیه و تحلیل پروفایل های بیان ژن در ماهیچه اسکلتی ژن MYH7 به عنوان ژن کاندیدای مربوط به انقباض عضلانی شناسایی شده است. هدف این مطالعه، بررسی بیان ژن MYH7 در بافت های ران، دست و راسته بره های پرواری نژاد کرمانی بود.

در پژوهش حاضر نمونه برداری از شش راس بره نر کرمانی  از بافت های ران، دست و راسته با سه تکرار در هنگام کشتار انجام شد و  تعداد کل 54 نمونه به دست آمد. RNA کل با استفاده از کیت استخراج (شرکت دنازیست) انجام شد.  کیفیت و کمیتRNA  استخراج شده با روش الکتروفورز روی ژل آگارز 2 درصد و با استفاده از دستگاه نانودراپ مورد ارزیابی قرار گرفت. برای سنتز  cDNAاز روی RNA استخراج شده از کیت سنتز cDNA شرکت parstous استفاده شد. از واکنش real time PCR به روش Syber Green برای بررسی میزان نسبی بیان ژن ها استفاده شد. از روش Pfaffl et al. (2002) برای تجزیه و تحلیل داده های حاصل از real time PCR استفاده شد.

نتایج بررسی کیفیت RNA های استخراج شده در طول موج A260/A280 نشان داد که کیفیت 8/1-9/1 مناسب و مطلوب است. به علاوه، مشاهده دو باند 18S و 28S برای RNA روی ژل آگارز نشان داد که RNA سالم است و نبود باند اضافی روی ژل نشان داد که RNA استخراج شده خالص است. نتایج منحنی های real time PCR و الکتروفورز محصولات PCR روی ژل آگارز (2 درصد) نشان داد که ژن MYH7 در بافت های دست، ران و راسته بره های نر کرمانی تکثیر و بیان می شود. در بافت های دست، ران و راسته باند 283 جفت بازی برای ژن MYH7 و برای ژن بتااکتین باند 112 جفت بازی در همه نمونه ها مشاهده شد. این مشاهدات نشانگر این بود که آزمایش صحیح انجام شده است و قطعات مورد نظر به درستی تکثیر شده اند. نتایج حاصل از این پژوهش نشان داد که این ژن در سه بافت دست، ران و راسته بیان می شود.

در پژوهش حاضر مشخص شد که ژن MYH7 در بافت های ماهیچه های ران، دست و راسته بیان می شود. لذا، می توان نتیجه گرفت که ژن MYH7 در ماهیچه های مختلف، که برای تولید بیشتر گوشت در نژادهای گوشتی بسیار ضروری هستند نقش ایفا می کند.