تشخیص سریع مننژیت منگوکوکی با روش PCR

طراحی و کاربرد روش حساس و اختصاصی PCR برای تشخیص نایسریا مننژیتیدیس در نمونه های بالینی ژن ctrA به عنوان ژن اختصاصی برای شناسایی نایسریا مننژیتیدیس انتخاب شد. به منظور بهینه سازی آزمایش از سویه استاندارد نایسریا مننژیتیدیس گروه B با کد ATCC;13090 و نمونه بالینی نایسریا مننژیتیدیس گروه C استفاده شد. برای بررسی از باکتری های پاتوژن هموفیلوس آنفلوآنزا تیپ b، اشریشیا کولیATCC;35218، انتروباکتر، کلبسیلا پنومونیه، استرپتوکوک پنومونیه، استافیلوکوک آرئوس و استرپتوکوک گروه D استفاده شد. برای استخراج DNA از روش فنل کلروفرم استفاده و محصول پس از الکتروفورز در ژل آگارز 2 درصد با رنگ اتیدیوم بروماید رنگ آمیزی و شناسایی شد.
نتایج این مطالعه نشان می دهد باکتری های استاندارد مورد آزمایش، محصول مورد نظر را تولید می کنند. در حقیقت، جفت پرایمر انتخاب شده، محصولی در اندازه101bP تولید می کند. آزمایش اختصاصیت نشان داد روش حاضر با هیچ یک از باکتری های غیرهدف واکنش نشان نمی دهد. بررسی حساسیت نیز نشان داد که حد نهایی تشخیص DNA نایسریا مننژیتیدیس در این روش fg500 است.
نتایج بهینه سازی نشان داد که روش PCR طراحی شده در این تحقیق از سرعت، حساسیت و اختصاصیت لازم برخوردار است و دست یابی به نتیجه نهایی در زمانی کمتر از سه ساعت امکان پذیر است، به کارگیری این روش در آزمایشگاه های بالینی تشخیص سریع نایسریا مننژیتیدیس را در نمونه های بالینی امکان پذیر می کند.