علت عدم نیاز به یونMg2+ در آنزیم فسفاتیدات فسفوهیدرولاز غشایی نسبت به فرم سیتوزولی آن در...

آنزیم فسفاتیدات فسفوهیدرولاز (PAP)، تبدیل اسید فسفاتیدیک به دی آسیل گلیسرول و فسفات را کاتالیز می کند. این آنزیم در کبد موش صحرایی دارای دو فرم می باشد. یک فرم سیتوزولی (PAP1) در متابولیسم گلیسرولیپیدها نقش داشته و برای فعالیت نیازمند یون Mg2+ می باشد. فرم دیگر آن(PAP2) غشایی است که در Signal transduction دخیل است و جهت فعالیت خود نیازی به یون Mg2+ ندارد. PAP2 دارای دو ایزوفرم PAP2a و PAP2b می باشد. اطلاعات محدودی پیرامون خواص آنزیمولوژیکی، مکانیسم عمل PAP2 و علت عدم نیاز آن به Mg2+ نسبت به PAP1 وجود دارد. در تحقیقات انجام گرفته بر روی این آنزیم همواره خصوصیات سوبسترای متفاوت آن از نظر دور مانده است. به همین دلیل اهداف این تحقیق برروی فعالیت آنزیم و چگونگی پاسخ های آن به برخی از عوامل از جمله Mg2+، علت عدم نیازمندی آن به Mg2+ و تاثیر ساختارشکن های اوره و گوانیدین هیدروکلراید بر فعالیت آنزیم از دیدگاه سوبسترای آن می باشد.
مواد و روش ها آنزیم غشایی PAP2b طی چندین مرحله کروماتوگرافی از کبد موش صحرایی تخلیص گردید. تمایل آنزیم PAP2b در مصرف فرم های (Lamellar)La و (Hexagonal)HII سوبسترای فسفاتیدات در حضور غلظت های مختلف تریتون X-100 بررسی شد. تاثیر زمان و اثر ساختارشکن های مذکور بر روند تبدیل فرم La به HIIفسفاتیدات بررسی شد. مقدار فرم La به روش هضم فسفولیپیدی در حضور ساختارشکن ها و غلظت های مختلف یون Mg2+ بررسی شد.