کاربرد توام روش جداسازی ایمیونو مگنتیک و واکنش زنجیره ای پلی مراز چندگانه ای جهت جستجو و ردیابی سالمونلاانتریکا تحت گونه انتریکا سرو وار تیفی موریوم در نمونه های مدفوع اسهالی گاو

چکیده در این تحقیق تعداد 400 نمونه مدفوع اسهالی گاو و گوساله اخذ و به موازات آزمایش های متداول کشت میکروبی و سروتایپینگ، بر روی نمونه ها آزمایش جداسازی با ذرات آهن ربای ایمن(ایمیونومگنتیک)و و اکنش زنجیره ای پلی مراز چندگانه ای انجام گرفت. برای شناسایی سالمونلا ها در سطح جنس از پرایمر عمومی inv-A و جهت جستجو و ردیابی سرو وار تیفی موریوم از سه جفت پرایمر اختصاصی Rfbj، Fljb و Flic مربوط به توالی ژن های سنتزکننده پادگن های 4O، 2‚2:1H و: i1H استفاده شد. از 400 نمونه مدفوع اسهالی گاو و گوساله که مورد آزمایش باکتریولوژیک قرار گرفت تعداد 33 مورد(25/8 درصد)سالمونلا جدا گردید. سالمونلا انتریکا سرووار تیفی موریوم با 22 مورد(7/66 درصد)، سالمونلا دابلین با 3 مورد(1/9 درصد)، سالمونلا ویرشو و سالمونلا گلوچستر هر کدام با 2 مورد(1/6 درصد)، سالمونلا انتریتیدیس، سالمونلا جورجیا، سالمونلا آگوستنبورگ و سالمونلا لیندنبورگ هر کدام با 1 مورد(3 درصد)بالاترین فراوانی را به خود اختصاص دادند. در آزمایش PCRچندگانه ای با استفاده از پرایمرهای مربوطه. چهار نوع محصول افزایش یافته 663، 526،284 و 183 جفت بازی به ترتیب مربوط به ژن های rfbj، fljb، inv-A و flic در کلیه نمونه های واجد سروتیپ تیفی موریوم)2‚1::i12‚5‚4‚1(مشاهده شد. نتایج این تحقیق نشان داد که تشخیص اختصاصی سرووار تیفی موریوم با استفاده از پرایمر های اختصاصی ژن های بیان کننده پادگن های 4O،: i 1Hو 2‚2:1H می تواندبسیار موفقیت آمیز باشد، زیرا تنها سرووار است که از بین 2550 سرووار سالمونلا این نوع الگوی پادگنی را دارد. واژه های کلیدی: سالمونلا تیفی موریوم، ایمیونو مگنتیک، PCRچندگانه ای، مدفوع، ژن های rfbj،fljb، .inv-A