تشخیص سریع و اختصاصی سالمونلا تیفی موریوم با استفاده از روش واکنش زنجیره ای پلیمراز- الایزا (PCR_ELISA)

سالمونلا تیفی موریوم یکی از بیماری زاهای مهم غذایی است که باعث ایجاد گاستروانتریت می شود. در این تحقیق روش PCR-ELISA برای شناسایی سالمونلا تیفی موریوم به کار گرفته شده است.

ژن rfb، که مسئول بیوسنتز آنتی ژن O از لیپوپلی ساکارید باکتری است، به عنوان توالی هدف انتخاب گردید. آغازگرهای تعیین شده منجر به تکثیر قطعه 882 جفت بازی برای گونه سالمونلا تیفی موریوم شد. نمونه های غذایی آلوده به باکتری سالمونلا تیفی موریوم و همچنین نمونه های بالینی و گونه های استاندارد مورد بررسی و آزمایش قرار گرفت. محصول PCR به طور تصادفی با دیگوکسی ژنین نشان دار و به کف ظرف های دارای استرپتواویدین منتقل و به روش الایزا و با استفاده از آنتی بادی ضد دیگوکسی ژنین مورد بررسی قرار گرفت. از کاوشگر داخلی نشان دار با بیوتین نیز برای تایید محصول PCR استفاده گردید.

اختصاصی بودن روش با بررسی 20 نمونه سالمونلا و 6 نمونه غیر سالمونلا ارزیابی شد که فقط نتایج گونه تیفی موریوم مثبت و بقیه گونه ها منفی بود. الایزا دقت و حساسیت روش PCR را تا حدود 1000 برابر افزایش داد.

روش ارائه شده در این تحقیق با توجه به طولانی بودن روش های مرسوم کشت، برای تایید وجود باکتری در نمونه های بالینی و غذایی می تواند یک شیوه تشخیصی حساس و کارآمدی برای شناسایی و غربالگری سالمونلا تیفی موریوم باشد. روش حاضر در غربالگری های وسیع با توجه به حساسیت بالا می تواند ضمن تشخیص اختصاصی تر، جایگزین خوبی برای PCR باشد.