شناسایی و تعیین خصوصیات یک میکوویروس dsRNA دار در Fusarium oxysporum f.sp.melonis

در این تحقیق جدایه های Fusarium oxysporum f. sp. melonis، عامل پژمردگی فوزاریومی طالبی و خربزه (Cucusmis melo) که از منطقه مهارلو (شرق شیراز) جمع آوری گردیده بود، از نظر آلودگی به میکوویروس بررسی شدند. چهار قطعه نوکلئیک اسید ویروسی در یک جدایه F. oxysporum بدست آمده از بافت ساقه طالبی، شناسایی شد. ماهیت dsRNA این مولکولها با استفاده از تیمار آنزیمی با RNase و DNase تایید گردید. توده میسلیومی جدایه با کشت در محیط مایع عصاره سیب زمینی بدست آمد. سپس با استفاده از کروماتوگرافی در ستون سلولز CF-11، مولکولهای dsRNA جداسازی شدند. اندازه تقریبی این قطعات 0.7، 2.3، 2.5 و 3 کیلوجفت باز بود. الکترون میکروسکوپی آموده خالص سازی شده ویروس، پیکره های ایزومتریک به قطر تقریبی 35 نانومتر را نشان داد. همسانه سازی و تعیین ترادف بخشی از بزرگترین قطعه (dsRNA I) dsRNA، نشان داد که ترادف اسید آمینه حاصل از آن شباهت قابل ملاحظه ای با پلی مراز اعضای جنس Chrysovirus دارد. نام FuOMV برای این ویروس پیشنهاد شد. تلاش برای حذف dsRNA از قارچ با جداسازی و کشت نوک ریسه یا تیمار با سیکلوهگزامید تا غلظت 200 میکروگرم در میلی لیتر، توام با نگهداری در دمای 32oC ناموفق بود. آزمون بیماری زایی بر روی ارقام حساس با مایه زنی به روش فرو بردن ریشه در سوسپانسیون به غلظت 5×105 کنیدیوم درمیلی لیتر نشان داد که جدایه حاوی ویروس بیماری زا می باشد. وجود مولکول های شناسایی شده dsRNA اثر خاصی بر مرفولوژی و بیماری زایی Fusarium oxysporum f. sp. melonis نداشت. با توجه به نتایج مولکولی و بیولوژیکی، FuOMV یک کرایزو ویروس تشخیص داده شد.