افزایش تکثیر سلول های پیش سر عصبی حاصل از سلول های بنیادی کارسینومایی رویائی با استفاده از دهیدرواپی اندرواسترون

سلول p19 بعنوان یک سلول بنیادی سرطانی جنینی، بعد از کشت بصورت توده ای و مجاورت با اسید رتینوئیک به سلول های عصبی،آستروسیتی وفیبروبلاستی تمایز می یابد. دهیدرواپی اندرو استرون، یکی از انواع نورواسترودید است که تکثیر سلول های پیش ساز عصبی و تمایز این سلول ها را افزایش می دهد. در این مطالعه اثر فاکتورهای دهیدرواپی اندرواسترون (DHEA) و اسید رتینوئیک (RA) به تنهایی و اثر اسید رتینوئیک + دهیدرواپی اندرواسترون بر القای تمایز سلول های بنیادی کارسینومای رویانیP19 به سلول های پیش سازعصبی بررسی خواهد شد.
سلول های P19 همزمان با تشکیل اجسام شبه رویانی (Embryoid Bodies)، به مدت 6 روز تحت تیمار های اسید رتینوئیک (RA) و دهیدرواپی اندرواسترون (DHEA) با غلظت های مختلف قرار گرفت. محیط این سلول ها در چهار روز اول حاوی DMEM با 5 درصد سرم جنین گاوی بوده به طوری که مقدار سرم در دو روز آخر به 3 درصد کاهش یافت. به منظور ارزیابی سلول های پیش ساز عصبی از آزمون های فلوسایتومتری، RT-PCR و ایمونوسیتوشیمی استفاده شد. سپس سلول های اجسام شبه رویانی از هم جدا شده و در محیط عصبی قرار گرفته و بعد از 4 روز مورفولوژی سلول ها بررسی شد.
مطالعات فلوسایتومتری علیه آنتی بادی Nestin و Brdu/Nestin به ترتیب درصد سلول های پیش ساز عصبی ودرصد تکثیر سلول های پیش ساز عصبی درگروه های مختلف اسید رتینوئیک و دهیدرواپی اندرواسترون به تنهایی و اسید رتینوئیک + دهیدرواپی اندرواسترون بررسی شده وآزمایش ایمونوسیتوشیمی Brdu/Nestin هم تکثیر سلول های پیش ساز عصبی را نشان داد. علاوه بر این آزمایش RT-PCR بیان ژن های Mash1، Nestin، pax-6وER (پاسخ دهنده استروژن) را تایید کرد. یافته ها نشان داد، گروه تحت تیمار اسید رتینوئیک (1μM) + دهیدرواپی اندرواسترون افزایش معنی داری در درصد سلول های پیش ساز عصبی و درصد تکثیر سلول های پیش ساز عصبی نسبت به سایر گروه ها مشاهده شد.
نتایج نشان داد که دهیدرواپی اندرواسترون به همراه اسید رتینوئیک سبب افزایش سلول های پیش ساز عصبی و افزایش تکثیر سلول های پیش ساز عصبی در سلول های پیش ساز عصبی مشتق شده از سلول P19 شده، اما در مقایسه با اسید رتینوئیک، به تنهایی نمی تواند سبب القای سلول های پیش ساز عصبی شود.