استفاده از Nested-PCR برای تعیین جنسیت جنین انسان

تعیین غیرتهاجمی جنسیت جنین انسان با استفاده از روش Nested-PCR، از طریق خون مادران باردار در 8 تا 12 هفته بارداری در مرحله اول مخلوطی از نمونه های خون افراد سالم مذکر و مونث به کار برده شد. بر روی این نمونه ها روش استخراج DNA و به دنبال آن روش PCR بهینه سازی گردید. سپس با کسب رضایت مادران باردار، در 8 تا 12 هفته بارداری، از آنان نمونه خون تهیه گردید. از سرم و پلاسما و گلبولهای سفید این نمونه ها، DNA استخراج و بر روی آنها روش Nested-PCR انجام گردید. در دور اول PCR این روش، با به کارگیری پرایمرهای خارجی ژن مخصوص کروموزوم Y یا ژن تعیین کننده جنسیت(SRY: Sex determining Region Y) Y، قطعه 472 جفت بازی و در دور دوم PCR، قطعه 254 جفت بازی DNA تکثیر یافت که حاکی از وجود جنین مذکر بود.
در این مطالعه 70 نمونه خون مادران آنالیز گردید و فقط 32 مورد از زایمانها پیگیری و معلوم شد که 18 مورد از نوزادان متولد شده مذکر بوده است. نتایج این پژوهش نیز نشان داد که در نمونه های سرم، 21 مورد (3 مورد خطا) و در نمونه های گلبولهای سفید خون، 22 مورد (4 مورد خطا) مذکر تشخیص داده شده بودند. به عبارت دیگر در مورد نمونه های سرم نتایج به میزان 62/90درصد و در گلبولهای سفید خون به میزان 25/81 درصد موفقیت آمیز بوده است که نزدیک به کارهای دیگران (5/91درصد) است. در این پژوهش از به کار گیری DNA آزاد پلاسما نتیجه مطلوبی حاصل نگشت.
صحت بیشتر این نتایج زمانی معلوم می گشت که امکان دست یابی به تمام این مادران وجود داشت. با این حال، این پژوهش نشان داد که سرم خون این مادران، منبع مناسبی برای تعیین جنسیت جنین است و می تواند در بررسی های دیگر مربوط به تشخیص بیماری های ژنتیکی قبل از تولد مورد توجه قرار گیرد.