تحریک خاموشی ژن با استفاده از سازه با قابلیت ترانویسی از دو جهت

قطعه ای دی.ان.ای (DNA) ازیک دی.ان.ای مکمل (cDNA) ژنوم کامل ویروس برگ قاشقی سیب زمینی(PLRV) که بخشی ازژن رپلیکاز ویروس را شامل می شود، به وسیله واکنش زنجیره ای پلی مراز (PCR) تکثیرگردید. قطعه حاصل به حالت سنس(sense) به درون یک پلاسمید ناقل در محل همسانه سازی چند اتصالی (Polylinker cloning site) آن که ازهر دو طرف به وسیله یک پیش بر احاطه شده است الحاق گردید. بدین ترتیب نسخه برداری همزمان سنس و آنتی سنس (Antisense) آر.ان.ای پیک (mRNA) صورت می پذیرد. گیاهان توتون و سیب زمینی با استفاده از آگروباکتریوم با سازه مورد نظر تراژن شده و گیاهان کامل باززایی شدند. با آلوده سازی مصنوعی گیاهان تراریخته توتون (مایه زنی با شته) و سیب زمینی (با استفاده ازپیوند) مقاومت به ویروس برگ قاشقی سیب زمینی در آنها ارزیابی شد. 59 درصد از لاین های تراریخته توتون که با سازه مورد نظر تراریخت شده بودند عیار کمتری از ویروس را دارا بودند در حالی که لاین های تراریخته با سازه هایی که تنها حالت سنس یا آنتی سنس ژن مورد نظر را بیان می کردند دارای عیار بالاتری بودند. در گیاهچه های تراریخته شده سیب زمینی که با پیوند مایه زنی شدند هیچ یک از لاین ها مقاومتی در برابر ویروس نشان ندادند. با استفاده از یکی از آغازگرها در ترانویسی معکوس، بیان ترادف مورد نظر به صورت سنس و آنتی سنس در لاین های تراریخت شده توتون نشان داده شد. این نخستین باری است که چنین ساختاری، قادر به بیان آر.ان.ای پیک از هر دو جهت ژن، آزمایش می شود. به نظر می رسد که بیان همزمان سنس و آنتی سنس آر.ان.ای پیک از ژن مورد نظر و به دنبال آن تشکیل آر ان ای دو رشته توانسته است خاموشی ژن پس از ترانویسی را القا نماید.