جداسازی و همسانه سازی ژن کاهنده جیوه معدنی (merA) از باکتری های مقاوم به جیوه

چکیده:
مقدمه
برخی باکتری ها با داشتن ژن merA کدکننده آنزیم کاهنده جیوه معدنی، توانایی ژنتیکی برای حذف جیوه از طریق احیای جیوه معدنی و تبدیل آن به شکل گازی و در نتیجه پاکسازی منطقه آلوده را دارند. هدف مقاله حاضر، جداسازی ژن merA از باکتری های مقاوم به جیوه و همسانه سازی آن در وکتور بیانی مناسب به منظور طراحی وکتور پایه ای برای تولید این آنزیم در باکتری و استفاده از آن برای پاکسازی محیط زیست است.
مواد و روش‏‏ها: تعدادی باکتری موجود در مناطق آلوده به جیوه برای جداسازی ژن merAانتخاب شدند. واکنش زنجیره ای پلیمراز برای جداسازی و همسانه سازی ژن merAبا استفاده از آغازگرهای اختصاصی روی ژنوم چهار باکتری Klebsiella pneumoniae،Pseudomonas aeruginosa،Serratia marcescensوEscherichia coli انجام شد. قطعه های تکثیری در وکتور بیانی pET21a+، همسانه سازی شدند و به روش شوک حرارتی به باکتری های مستعد E. coli TOP10 تراریزش شدند. خوشه بندی ژن کلون شده با ژن های موجود از این نوع در NCBI با استفاده از نرم افزار MEGA ویرایش 4 و بررسی های بیوانفورماتیکی برای توالی آنزیم پیش بینی شده انجام شدند.
نتایج
ژن merAبا طول 1686 جفت باز از باکتری های K. pneumoniaeوE. coliجداسازی شد. وکتورهای نوترکیب به روش های مختلف تایید شدند و درستی کار با انجام توالی یابی تایید شد. نتایج خوشه بندی، شباهت زیاد این ژن با ژن آنزیم کاهنده جیوه معدنی K. pneumoniaeوE. coli در NCBI را نشان داد.
بحث و نتیجه گیری: وجود ژن merA در باکتری های سازگار به مناطق آلوده به جیوه، یکی از عوامل مقاومت است که با همسانه سازی آن در وکتور حاوی پروموتور بیانی و انتقال آن به باکتری ها، ایجاد و یا افزایش توانایی باکتری های حساس در حذف مقادیر زیاد جیوه امکان پذیر خواهد بود.
زبان:
فارسی
صفحات:
19 تا 31
لینک کوتاه:
magiran.com/p1763756 
دانلود و مطالعه متن این مقاله با یکی از روشهای زیر امکان پذیر است:
اشتراک شخصی
با عضویت و پرداخت آنلاین حق اشتراک یک‌ساله به مبلغ 990,000ريال می‌توانید 70 عنوان مطلب دانلود کنید!
اشتراک سازمانی
به کتابخانه دانشگاه یا محل کار خود پیشنهاد کنید تا اشتراک سازمانی این پایگاه را برای دسترسی نامحدود همه کاربران به متن مطالب تهیه نمایند!
توجه!
  • حق عضویت دریافتی صرف حمایت از نشریات عضو و نگهداری، تکمیل و توسعه مگیران می‌شود.
  • پرداخت حق اشتراک و دانلود مقالات اجازه بازنشر آن در سایر رسانه‌های چاپی و دیجیتال را به کاربر نمی‌دهد.
دسترسی سراسری کاربران دانشگاه پیام نور!
اعضای هیئت علمی و دانشجویان دانشگاه پیام نور در سراسر کشور، در صورت ثبت نام با ایمیل دانشگاهی، تا پایان فروردین ماه 1403 به مقالات سایت دسترسی خواهند داشت!
In order to view content subscription is required

Personal subscription
Subscribe magiran.com for 50 € euros via PayPal and download 70 articles during a year.
Organization subscription
Please contact us to subscribe your university or library for unlimited access!