طراحی و ساخت RNA تداخل گر(RNAi) باهدف کاهش بیان ژن کاندید درگیر در سرطان

سرطان یکی از مهم ترین عوامل تهدید کننده سلامت محسوب می شود. توسعه روش های درمانی مبتنی بر فرایند های RNA های تداخل گر (RNAi) نتایج قابل قبولی را به دنبال داشته است. یکی از مهم ترین مشکلات سیستم های siRNA، پایداری کم آن می باشد. از جمله راهکارهای غلبه بر این ضعف، معرفی انواع مختلفی از RNAهای سنجاق سری یا shRNA بوده است. ژن OCC-1 (Overexpressed in Colon Carcinoma) دارای رونوشت های متعددی می باشد که به عنوان مشخصه سرطان کولورکتال در نظر گرفته شده است. این ژن نقش مهمی در ایجاد و پیشرفت سرطان کولورکتال از طریق مسیرهای پیام رسان سلولی دخیل در تکثیر سلولی دارد. در تحقیق حاضر از روش RNA تداخل گر یا RNAi به منظور کاهش بیان رونوشت ویژه ای از ژنOCC-1 استفاده شده است.
سازه خاموش گر طراحی شد و سپس در ناقل بیانی pRNA-H1.1/Neo که دارای پروموتر برای RNApolIII می باشد، کلون گردید. پلاسمید در رده سلولی سرطان کولورکتال ترانسفکت گردید و بیان رونوشت OCC-1 در زمان های 24 و 72 ساعت بعد از ترانسفکشن نسبت به نمونه کنترل با روش Real-time PCR مورد بررسی قرار گرفت .
بیان رونوشت OCC-1 در زمان 72 ساعت بعد از ترانسفکشن، نسبت به نمونه کنترل حدود 25 درصد کاهش یافت.
نتایج نشان می دهد سازه shRNA طراحی شده به صورت موفقیت آمیزی باعث کاهش بیان ژن مورد هدف شده است که با توجه به نتایج می توان از آن در مطالعات آینده به منظور کشف تاثیر این رونوشت بر ایجاد یا پیشرفت سرطان کولورکتال، استفاده نمود.