خاموشی سیستمیک ژن کدکننده آنزیم تبائین -6- ا- دمتیلاز در گیاه دارویی خشخاش (Papaver somniferum L.) با استفاده از فن خاموشی ژن با القا ویروس

گیاه دارویی خشخاش (Papaver somniferum L.) به عنوان یکی از مهمترین منابع تجاری برای برخی از آلکالوئیدهای دارویی مانند ضد درد کدئین و مورفین و داروهای نیمه مصنوعی مانند اکسی کدون، بوپرونورفین و نالتروکسن میباشد. از ژنهای پائین دست مسیر بیوسنتزی آلکالوئیدها در این گیاه، ژن تبائین -6- ا- دمتیلاز (T6ODM) است که بر تولید موادی مانند تبائین و اوریپاوین تاثیرگذار است. در این پژوهش، اثر سازه خاموشی متکی بر فن VIGS، بر کاهش سطح بیان این ژن در گیاه خشخاش مطالعه شد. برای این منظور، ابتدا با استفاده از آغازگرهای اختصاصی، cDNA ژن T6ODM تکثیر شد و برای تایید مورد توالی یابی قرار گرفت.
سپس بخشی از ژن به عنوان قطعه هدف خاموشی در ناقل ویروسی pTRV همسانهسازی شد و به روش آگروباکتری، برگهای گیاه تراریخت شد. حضور ژن کد کننده پروتئین پوششی موجود در ناقل ویروسی در گیاهان با استفاده از PCR بررسی و سطح بیان ژن در گیاهان تراریخت توسط تجزیه وتحلیل نیمه کمی و PCR در زمان واقعی بررسی شد. نتایج نشان داد که میانگین بیان ژن T6ODM در گیاه حاوی سازه مورد نظر نسبت به گیاهان شاهد 71/83 درصد کاهش داشت.