بررسی اثر هیالورونیک اسید بر رفتار سلول های فیبروبلاستی پوست کشت داده شده بر داربست کیتوسان

مهندسی بافت روش جدیدی برای جایگزینی اجزاء بافت تخریب شده توسط پلیمرهای زیست تخریب پذیر می باشد که به صورت داربستی سه یعدی برای رشد و تکثیر سلول ها ی بنیادی تهیه می گردد. به این منظور در این مطالعه ازداربست کیتوسان استفاده شد تا در حضور هیالورونیک اسید، میزان مهاجرت و تکثیر سلول های فیبروبلاست مورد ارزیابی قرار گیرد.
در این مطالعه از کیتوسان داربستی جهت رشد سلول های فیبروبلاست تهیه شد. سپس جهت مطالعات بعدی داربست های تولید شده به گروه های زیر تقسیم بندی شدند:گروه1: داربست کیتوسان با هیالورونیک اسید
گروه 2: داربست کیتوسان بدون هیالورونیک اسید
گروه 3(کنترل1): سلول فیبروبلاست با هیالورونیک اسید
گروه 4 کنترل2): سلول فیبروبلاست بدون هیالورونیک اسید
پوست ختنه گاه انسان تهیه و سلول فیبروبلاست موجود در لایه ی درم آن پس از مراحل جداسازی سانتریفیوژ شدند و سلول ها به همراه محیط کشت DMEM به فلاسک های کشت منتقل ودر انکوباتور CO2 دار نگهداری شدند . پس از چند بار پاساژسلولی ، ده هزارسلول در چاهک های 96 خانه ای حاوی محیط کشت DMEM منتقل و با استفاده از روش MTT و رنگ آمیزی DAPI مهاجرت و نفوذ سلول های فیبروبلاست بر روی داربست کیتوسان بررسی گردیدند. نتایح بدست آمده پس از بررسی یکنواختی داده ها با کمک نرم افزار آماری SPSS و آزمون ANOVA و تست تعقیبی توکی مورد تجزیه و تحلیل قرار گرفت.
نتایج نشان می دهدکه میانگین بقاء در داربست کیتوسان بدون هیالورونیک اسید در 24 ساعت در مقایسه با گروه های کنترل با و بدون هیالورونیک اسید و گروه کیتوسان با هیالورونیک اسید افزایش آماری معنی دار نشان می دهد (P<0.05 ). میانگین بقاء در گروه کنترل بدون هیالورونیک اسید در 48 ساعت در مقایسه با گروه داربست کیتوسان با و بدون هیالورونیک اسید وگروه کنترل با هیالورونیک اسید افزایش آماری معنی دار نشان می دهد (P<0.05 ). میانگین بقاء در داربست کیتوسان با و بدون هیالورونیک اسید در 72 ساعت در مقایسه با گروه های کنترل با و بدون هیالورونیک اسید از نظر آماری معنی دار نمی باشد.
نتایج این تحقیق نشان داد که داربست کیتوسان با توجه به خاصیت هیدروفیل بودن ، زیست سازگاری بهتری با سلول های فیبروبلاست نشان می دهد که احتمالا کیتوسان می تواند در ساختارهای که به صورت سنتزی جهت ترمیم نواحی آسیب دیده پوست تهیه می شود نقش مناسب و تکمیل کننده داشته باشد.