تولید پپتید ضد میکروبی درماسپتین B1 نوترکیب در سیستم کشت ریشه های موئین توتون و زیست سنجی اثرات ضد باکتریایی

کشت ریشه های موئین راهکاری مناسب برای تولید پروتئین های نوترکیب در گیاهان است. پپتیدهای ضد میکروبی، بخش حیاتی و مهم از سیستم پاسخ ایمنی ذاتی همه موجودات زنده محسوب می شوند. فعالیت انتخابی دقیق و اثرات سمی محدود روی سلول های پستانداران، پپتیدهای ضد میکروبی را به کاندیداهای مناسبی برای جایگزینی آنتی بیوتیک ها در معضل مقاومت های دارویی بدل ساخته است. هدف از تحقیق حاضر، تولید پپتید ضد میکروبی نوترکیب درماسپتین B1 در ریشه های موئین گیاه توتون و بررسی اثرات ضد باکتریایی آن بود.
توالی کدکننده ی درماسپتین B1 در یک ناقل بیانی همسانه سازی شد و برای تولید ریشه های موئین توسط Agrobacterium rhizogenes به توتون منتقل گردید. با استفاده از تکنیک های PCR و RT-PCR، به ترتیب انتقال ترانس ژن و بیان آن در ریشه های موئین بررسی شد. فعالیت ضد باکتریایی این پروتئین نوترکیب علیه باکتری های Enterococcus faecium، Enterococcus faecalis و Escherichia coli در غلظت های مختلف پروتئین کل، مورد ارزیابی قرار گرفت.
حضور سامانه ژنی و بیان آن در ریشه های موئین تراریخت اثبات شد. نتایج آزمون ضد میکروبی نشان داد که غلظت های مختلف عصاره پروتئین کل دارای اثرات ضد میکروبی معنی داری (05/0P<) روی رشد هر دو گروه باکتری های گرم مثبت و گرم منفی بود.
پپتید درماسپتین فیوژن با موفقیت در ریشه های موئین تولید شد و فعالیت ضد باکتریایی آن اثبات گردید. این نتایج نشان می دهد پپتید نوترکیب دارای خواص درمانی در کنترل پاتوژن ها می باشد؛ بنابراین از ریشه های موئین می توان برای تولید و خالص سازی پروتئین های نوترکیب ارزشمند با کاربردهای دارویی استفاده کرد.