هدفمند سازی بیان آنتی ژن سطحی هپاتیت ب (HBsAg) در غده های سیب زمینی با استفاده از روش بیان موقت

به‫منظور بررسی کارایی پیش‫بر اختصاصی غده (Patatin1) ، بیان آنتی ژن HBsAg واکسن هپاتیت ب در گیاه سیب زمینی با استفاده از روش بیان موقت (اگرواینفیلتریشن) مورد ارزیابی قرار گرفت. پیش‫بر اختصاصی غده (Pat1) با استفاده از آغازگرهای اختصاصی با روش واکنش زنجیری پلیمراز (PCR) از گیاه سیب زمینی جدا شد. این پیش‫بر در بالادست ژن بهینه سازی شده سنتزی HBsAg در ناقل دوگانه pBI121 همسانه سازی شد. به‫منظور مقایسه کارایی پیش‫بر اختصاصی Pat1، ژن HBsAg تحت کنترل پیش‫بر دایمی CaMV35S هم قرار داده شد. سازه های تهیه شده پس از انتقال به اگروباکتریوم با استفاده از روش اگرواینفیلتریشن به غده ها و برگ های گیاه سیب زمینی انتقال یافتند. بیان موقت آنتی ژن HBsAg با استفاده از روش الایزا اندازه گیری شد. بررسی بیان آنتی ژن HBsAg در برگ ها و غده های گیاه سیب زمینی نشان داد که پیش‫بر Pat1 به‫طور اختصاصی باعث بیان بالای آن در بافت های غده ای می شود. بیان اندک این آنتی ژن تحت کنترل پیش‫بر Pat1 در بافت های برگی هم گزارش شده و می تواند تاحدی به عوامل القا کننده در محیط تلقیح بستگی داشته باشند. در حالی‫که بیان آنتی ژن تحت پیش‫بر دایمی CaMV35S در تمامی بافت های برگی و غده ای اتفاق می افتد. همچنین نتایج حاصل نشان داد که ژن HBsAg بهینه شده کدنی برای گیاه سیب زمینی به‫خوبی عمل کرده و آنتی ژن مربوط را بیان می کند. نتایج این پژوهش نشان می دهد که از پیشبر اختصاصی غده سیب زمینی Pat1 همسانه سازی شده می توان به‫طور موثری برای بیان دایمی آنتی ژن سنتزی بهینه سازی شده کدنی HBsAg در گیاهان تراریخت سیب زمینی استفاده کرد.