طراحی و ساخت چهار حامل پلاسمیدی نوترکیب مناسب برای انتقال ژن های کیتیناز، گلوکاناز و Bt به گیاهان

چهار ناقل پلاسمیدی مناسب برای انتقال ژن به گیاه، از طریق ساخت کاست های ژنی برای ژن های بتا-1 و 3- گلوکاناز از منشا جو، کیتیناز از منشا لوبیا و cryIA(b) (Bt)، با قرار دادن هر یک از این ژن ها تحت پیشبر CaMV35S و پایان بر Nos در حامل پلاسمیدی دوگانه pBI121، تهیه گردید. ژن های کیتیناز و بتا- 1 و 3- گلوکاناز با کد کردن پروتئین هایی ضدقارچی، به ترتیب کیتین و گلوکان را که از اجزای اصلی دیواره سلولی بسیاری از قارچ های بیماری زا می باشند، تجزیه کرده و مقاومت گیاهان را در برابر بیماری های قارچی، افزایش می دهند. ژن cryIA(b) نیز با کد کردن پروتئین حشره کش، باعث از بین رفتن آفات پروانه ای خواهد شد. پلاسمید های نوترکیب pBI-Glu و pBI-Chi به ترتیب با کلون سازی ژن های کیتیناز و بتا- 1 و 3-گلوکاناز در محل ژن gus پلاسمید pBI121، ساخته شدند. ساخت پلاسمید نوترکیب pBI-ChiGlu، به گونه ای انجام گرفت که کاست های کامل هر دو ژن کیتیناز و گلوکاناز را برای ایجاد اثرات همفزایی این دو ژن، در برابر عوامل بیماری زای قارچی در برگیرد. پلاسمید نوترکیب pBI-ChiBt نیز که حاوی کاست های کامل ژن های کیتیناز و Bt می باشد، با هدف استفاده از آن برای انتقال ژن به منظور ایجاد مقاومت همزمان گیاهان به عوامل بیماری زای قارچی و آفات، در یک رویداد واحد انتقال ژن، تهیه گردید. این چهار حامل پلاسمیدی نوترکیب می توان در انتقال ژن به گیاهان، با استفاده از آگروباکتریوم و نیز سایر روش های انتقال ژن، نظیر تفنگ ژنی، استفاده کرد.