بررسی فعالیت پروموتورهای فاکتور رشد فیبروبلاستی 18 و گیرنده فعال کننده اوروکینازی پلاسمینوژن در دو رده سلولی سرطان کولون

ساخت سازه های گزارشگر با استفاده از پروموتورهای پایین دست دو مسیر سیگنالینگ Wnt و K-ras (به ترتیب پروموتورهای فاکتور رشد فیبروبلاستی 18 (Fibroblast Growth Factor18; FGF18) و گیرنده فعال کننده یوروکینازی پلاسمینوژن (Urokinase Plasminogen Activator Receptor; UPAR) و بررسی فعالیت این دو مسیر در دو رده سلولی سرطان کولون (HCT116 و SW480) پلاسمیدهای UPARLacZ و FGF18LacZ و کنترل منفی(pUCLacZ) و مثبت (CMVLacZ) و وکتور گزارشگر pRc/CMV2CAT ساخته شدند. بیان LacZ به وسیله رنگ آمیزی و الایزا پس از نرمالیزاسیون بیان β-Gal با بیان CAT (کلرامفنیکل استیل ترانسفراز) اندازه گیری شد.
در رنگ آمیزی FGF18LacZ نسبت به UPARLacZ در هر دو رده سلولی تعداد بیشتری از سلول ها را آبی کرده بود. این نسبت در SW480 بیشتر بود. هر دو سازه در هر دو رده سلولی دارای توانایی بیان بودند. هم چنین FGF18LacZ در هر دو رده سلولی به نسبت معنی داری فعال تر از UPARLacZ می باشد.پروموتور FGF18 در HCT116 و SW480 به ترتیب 34/1 و 4/4 برابر فعال تر از پروموتور UPAR می باشد.
بر خلاف اینکه در سلول HCT116 مسیر Ras فعال می باشد، پروموتور FGF18، فعال تر از پروموتور UPAR می باشد. البته پروموتور UPAR در HCT116 از SW480 فعال تر می باشد. این امر در راستای مطالعات پیشین می باشد که در همه رده های سلولی سرطان کولون حتی رده های بدون جهش در ژن های مسیر Wnt، مسیر Wnt فعال می باشد که مهم ترین مسیر سرطان زایی در سلول های اپی تلیال کولون می باشد. این سازه ها می تواند به عنوان ابزاری در بررسی این دو مسیر سیگنالینگ در رده های مختلف سلولی به کار گرفته شود.