جهت گیری سیتوزولی پراکسیزومال پروتئین موشی فاقد تری پپتید SKI متصل به پروتئین سبز فلورسنت در سلول های CHO-K1 و P19

آنالیز اسیدآمینه ای ژن پراکسیزومال پروتئین نشان می دهد که در انتهای کربوکسیل در این سازه قلمرو SKI وجود دارد. به منظور یافتن اهمیت این بخش، از طریق ایجاد موتاسیون هدف دار تری پپتید SKI حذف گردید و در سلول هایCHO-K1 و P19 ترانس فکت گردید.
به منظور ایجاد سازه جهش یافته مورد نظر PCR با استفاده از پرایمرهای مناسب صورت گرفت. موتانت حاصل در فرودست ژن EGFP تحت کنترل پروموتر CMV قرارداشت. پس از تعیین توالی باکمک لیپوفکتامین 2000 به درون سلول های CHO-K1 و P19 ترانس فکت گردید.
گرادیان دمایی PCR نشان می دهد که بهترین دمای اتصال، 6/71 درجه است. ترانس فکت نمودنEGFP-PeP الگوی سبز رنگ نقطه دار دارد، در حالی که سازه EGFP-PeP/ΔSKI پس از ترانس فکت نمودن الگوی یکنواخت سبز رنگ دارد.
با توجه به نتایج به دست آمده مشخص می شود که SKI در انتهای کربوکسیل پروتئین برای ورود به پراکسیزوم لازم و ضروری است.