Purification and survey on the kinetic properties from Lathyrus Sativus histaminase via anion exchange chromatography
Author(s):
Abstract:
Background
The histamine poisoning directly correlates to improper preservation of foods. Diamine oxidase catalyses the oxidative deamination of histamine and other biogenic amines such as cadaverine and putrescine. Plant diamine oxidases are of widespread occurrence in Leguminaceae such as Cicer arietinum، Lathyrus sativus and Vigna radiata. For this reason، this study was carried out to examine purification and enzyme kinetic properties of histaminase from the Lathyrus sativus seedling. Materials And Methods
The purification of histaminase was according to the method given by Federico et al.، with some modifications. In short، using ammonium sulfate precipitation of proteins، dialysis against potassium phosphate buffer 50mM، pH=7 over night، concentrating via dialysis bag and PEG، loading on DEAE52-sephadex column previously equilibrated with 15 mM potassium phosphate buffer pH=5. 5 containing 1 µmol CuCl2 and finally enzyme eluted by increasing the NaCl concentration to 0. 2 M. The homogenicity of enzyme was confirmed by SDS-PAGE in each step and diamine oxidase activity was determined by a spectrophotometer. Results
The specific activity of the final purified enzyme was recorded at 50 U/mg protein for histamine substrate and enzyme kinetic properties of this enzyme (Km=2. 5 mM، Vmax=3. 05)، and the homogenicity of purified enzyme by SDS-PAGE at 72 kDa region were indicated. Conclusion
Overall، the herbal histaminase as a new enzyme in prevention of histamine poisoning is promising.Keywords:
Language:
Persian
Published:
Yafteh, Volume:14 Issue: 2, 2012
Pages:
31 to 42
magiran.com/p1028586
دانلود و مطالعه متن این مقاله با یکی از روشهای زیر امکان پذیر است:
اشتراک شخصی
با عضویت و پرداخت آنلاین حق اشتراک یکساله به مبلغ 1,390,000ريال میتوانید 70 عنوان مطلب دانلود کنید!
اشتراک سازمانی
به کتابخانه دانشگاه یا محل کار خود پیشنهاد کنید تا اشتراک سازمانی این پایگاه را برای دسترسی نامحدود همه کاربران به متن مطالب تهیه نمایند!
توجه!
- حق عضویت دریافتی صرف حمایت از نشریات عضو و نگهداری، تکمیل و توسعه مگیران میشود.
- پرداخت حق اشتراک و دانلود مقالات اجازه بازنشر آن در سایر رسانههای چاپی و دیجیتال را به کاربر نمیدهد.
دسترسی سراسری کاربران دانشگاه پیام نور!
اعضای هیئت علمی و دانشجویان دانشگاه پیام نور در سراسر کشور، در صورت ثبت نام با ایمیل دانشگاهی، تا پایان فروردین ماه 1403 به مقالات سایت دسترسی خواهند داشت!
In order to view content subscription is required
Personal subscription
Subscribe magiran.com for 70 € euros via PayPal and download 70 articles during a year.
Organization subscription
Please contact us to subscribe your university or library for unlimited access!