بررسی سیکل سلولی در لنفوسیت های T فعال شده ی انسانی توسط آنتی بادی های مونوکلونالAnti-CD3 و Anti-CD28 در شرایط In vitro با استفاده از فلوسایتومتری

تکثیر لنفوسیت T برای ایجاد پاسخ ایمنی اکتسابی ضروری است و توسط گیرنده سلول T و به کمک محرک ها (CD28) ایجاد می شود و باعث ورود سلول به سیکل سلولی و گسترش کلنی سلول ها می شود. هدف از این مطالعه بررسی سیکل سلولی لنفوسیت های Tتحریک شده با آنتی بادی های مونوکلونال Anti-CD3 و Anti-CD28 در زمان های انکوباسیون مختلف با استفاده از فلوسایتومتری بود.
10 سی سی خون هپارینه از فرد داوطلب سالم تهیه شد. سلول های تک هسته ای خون محیطی توسط سانتریفوژ بر روی فایکول جدا شدند. پس از آن سلول ها در پلیت های 24تایی کشت پوشیده با آنتی بادی Anti-CD3 با غلظت 5 میکروگرم در میلی لیتر و با حضور آنتی بادی Anti-CD28 با غلظت 2 میکروگرم در میلی لیتر به صورت محلول فعال شدند و در محیط کشت کامل RPMI (Roswell park memorial institute medium) به مدت 24، 48، 72 و 96 ساعت کشت داده شدند. سپس آنالیز سیکل سلولی با استفاده از فلوسایتومتری انجام شد.
آنالیز سیکل سلولی لنفوسیت های T تحریک شده با استفاده از نمودارهای هیستوگرام نشان داد که همه ی سلول های فعال شده بعد از 24 و 48 ساعت در فاز G1 سیکل سلولی بودند ولی بعد از 72 و 96 ساعت سلول ها وارد فاز S و G2/M هم شده بودند.
طول مدت تحریک لنفوسیت T از طریق گیرنده ی سلول T و به کمک محرک آن (CD28) برای خارج شدن سلول ها از فاز G0 و ورود آن ها به فازهای مختلف چرخه ی سلولی بسیار مهم و ضروری می باشد. دوز سلول های تحریک شده بعد از 24 و 48 ساعت زمان کافی برای خروج سلول از فاز G1 وجود نداشت و همه ی سلول ها در فاز G1 مشاهده شدند ولی بعد از 72 و 96 ساعت زمان کافی برای ورود سلول ها به فاز S و G2/M وجود داشت.