لوپ خارج غشایی نوترکیب فعال آنتی ژن CD20 انسانی، جایگزینی برای آنتی ژن CD20 کامل

پس هدف گیری آنتی ژن CD20 با استفاده از آنتی بادی های مونوکلونال، رویکردی اصلی در درمان لنفوم های غیر هوچکین و ایمونوتراپی بدخیمی های لنفوسیت های Bشده است. در دسترس بودن آنتی ژن، فاکتوری بسیار مهمی در تولید آنتی بادی های مونوکلونال علیه آن می باشد. از طرفی، یک مشکل مهم در زمان بیان آنتی ژن CD20کامل، توده ای شدن و تاشدگی نامناسب آن است و تولید یک پلی پپتید جایگزین در مقایسه با پروتئین غشایی کامل CD20، راحت تر و مطلوب تر می باشد.
در این مطالعه، لوپ خارج غشایی CD20 انسانی (exCD20) که شامل 47 اسید آمینه ناحیه غیر گلیکوزیله آن می شود، بیان شد. توالی کد کننده exCD20 توسط PCR تکثیرگردیدو در وکتور بیانی pET32a(+) کلونشد. پروتئین مورد نظر در حالت متصل به تیوردوکسین و دارای His tag در سویه E.coli Origami بیان شد و به منظور اثبات فعال بودن پروتئین بیان شده، الایزا و وسترن بلات انجام گردید.
در این مطالعه، پروتئین نوترکیب exCD20به دست آمد که قابل شناسایی در الیزا و آزمون وسترن بلات بود. فیوژن پروتئین نوترکیب مذکور، محلول و پایدار بوده و فاقد مشکلات توده ای شدن و تاشدگی نامناسب بود.
لوپ خارج غشایی پروتئین CD20 انسانی در حالت متصل به تیوردوکسین، قابلیت استفاده در سنجش های فعالیت و برخی کاربردهای دیگر از جمله الایزا، ایمونوبلات، تخلیص تمایلی، ایمن سازی، غربالگری و تولید آنتی بادی های ضد CD20 را دارد.