جداسازی ملیتین از زهر زنبور عسل و بررسی تاثیر آن بر رشد سلول های سرطان معده

سرطان معده یکی از شایع ترین سرطان ها در سراسر جهان و ایران می باشد. از آن جا که روش های درمانی رایج مانند جراحی و شیمی درمانی به صورت تهاجمی و عوارض جانبی هستند، امروزه تحقیقات به منظور یافتن ترکیبات طبیعی با اثرات جانبی کم تر حایز اهمیت اند. در این مطالعه از سم زنبور عسل، پپتید ملیتین با 26 اسید آمینه جداسازی و تخلیص شد و تاثیر آن بر میزان زنده بودن و تکثیر سلول های سرطانی معده مورد بررسی قرار گرفت.
ابتدا ملیتین توسط کروماتوگرافی مایع با کارایی بالا- فاز معکوس (RP-HPLC) و با استفاده از ستون C18 از زهر زنبور عسل استخراج گردید. فعالیت بیولوژیکی ملیتین به وسیله تست همولیتیک بر روی گلبول های قرمز نسبت به استاندار ملیتین بررسی گردید. جهت بررسی تاثیر ملیتین بر زنده بودن و تکثیر سلول های سرطانی معده رده (AGS) Human Gastric Adenocarcinoma Cells، سلول های مربوطه در پلیت 96 خانه کشت داده شدند و با غلظت های مختلف ملیتین در زمان های 6 و 12 ساعت تیمار و میزان مرگ و میر سلول ها به روش رنگ سنجی MTT ((3-(4، 5-dimethylthiazol-2-yl)-2، 5- diphenyltetrazolium bromide در طول موج 540 نانومتر تعیین گردید.
کروماتوگرام حاصل از RP-HPLC مشخص نمود ملیتین 50% زهر مورد مطالعه را تشکیل می دهد. آنالیز فراکشن ملیتین توسط SDS-PAGE خالص بودن آن را تایید نمود. آزمون هولیتیک نشان داد ملیتین استخراج شده فعالیت همولیتیک بالایی (μg/ml5/0=50HD) از خود نشان می دهد. آزمون MTT نشان داد ملیتین در غلظت های بالاتر از μg/ml2 به شدت رشد سلول های سرطانی معده را مهار می کند. این اثر مهاری وابسته به غلظت ملیتین و مدت زمان اثر می باشد.
نتایج این پژوهش نشان داد که ملیتین مهار کننده قدرتمند رشد سلول های سرطان معده می باشد. هم چنین مشاهده گردید این اثر مهاری با افزایش غلظت ملیتین و مدت زمان اثر، افزایش می یابد.