تاثیر Chitosan بر ویژگی های استئوژنیک سلول های بنیادی مزانشیمال پالپ دندان شیری

پالپ دندان های شیری اکسفولیه شده، حاوی سلول های بنیادی با قابلیت تکثیر و کلونی زایی بالا می باشد. این سلول ها توانایی تمایز به رده های مختلف سلولی نظیر استئوبلاست، آدیپوسیت، کندروسیت و سلول های عصبی را دارند. این مطالعه با هدف ارزیابی تمایز سلول های بنیادی مزانشیمال جدا شده از پالپ دندان شیری به استئوبلاست و بررسی تاثیر گلوکزآمین در فرم Chitosan بر این تمایز، انجام شد.

پالپ دندان های شیری لق، که سالم و عاری از پوسیدگی بودند، بلافاصله پس از کشیدن دندان، خارج شده و در محلول هضم آنزیمی حاوی کلاژناز نوع 1 و دیسپاز غوطه ور شد. سپس در محیط کشت α Modified Eagle Medium (α MEM) محتوی 10 درصد Fetal Bovine Serum (FBS) کشت داده شدند. پس از سه هفته تشکیل کلونی توسط سلول ها ارزیابی شد. بررسی فلوسیتومتریک برای شناسایی مارکرهای سطحی سلول های بنیادی در روز 21 انجام گرفت. سلول های سومین پاساژ سلولی، جهت تمایز استئوژنیک در محیط کشت روتین و محیط کشت حاوی 10 میکروگرم در لیتر Chitosan، کشت داده شدند. ارزیابی تمایز استئوژنیک در روز 21 با اندازه گیری فعالیت آلکالین فسفاتاز و تعیین میزان تشکیل ندول های مینرالیزه با رنگ آمیزی Alizarin red انجام شد. نتایج حاصل به روش T-test آنالیز شد. برای بررسی نرمال بودن توزیع داده ها از آزمون غیر پارامتری Kolmogrov- Smirnov استفاده شد.

کلونی زایی بیش از 80% در سلول های مورد بررسی دیده شد. آنالیز نتایج فلوسیتومتری نشان داد که در سلول های جدا شده از پالپ دندان شیری مارکرهای مزانشیمال CD90، CD105، CD146 مثبت بودند. درحالیکه مارکرهای هماتوپوئتیک CD45، CD34 و مارکرسلول های اندوتلیال CD31 در آن ها یافت نشد. تشکیل ندول مینرالیزه و فعالیت آلکالین فسفاتاز در حضور گلوکزآمین به طور معنی داری بیشتر بود)001/0(P<.

سلول های بنیادی از پالپ دندان شیری اکسفولیه شده استخراج و کشت داده شد. این سلول ها توانایی تمایز استئوژنیک دارند و افزودن گلوکزآمین (Chitosan) به میزان 10 میکروگرم در لیتر تاثیر مثبتی در این تمایز دارد.