بررسی ارتباط بین کمبود پروتامین و آزاد شدن قطعات DNA از اسپرم های نگهداری شده در محیط مصرفی Ham's F10

کمبود پروتامین و آسیب DNA بر میزان بیان ژن ها در دوره ی جنینی اثر مهمی دارد. نگهداری اسپرم در محیط کشت موجب تغییرات مورفولوژیک هسته و آزاد شدن DNA می گردد. با وجود این، ارتباط بین کمبود پروتامین و میزان آزاد سازی قطعات DNA از اسپرم های نگهداری شده در محیط کشت و حضور ژن DNMT1 در این قطعات مشخص نمی باشد.
آنالیز مایع سیمن طبق معیار WHO انجام شد. جهت تعیین کمبود پروتامین از رنگ آمیزی CMA3 استفاده گردید. 20 میلیون اسپرم از هر نمونه در محیط مصرفی Ham’s F10 به مدت 24 ساعت در دمای 37 درجه ی سانتی گراد انکوبه شد. پس از سانتریفوژ کردن، از فاز سوپرناتانت استخراج DNA صورت گرفت. غلظت DNA توسط بیوفوتومتر تعیین گردید. حضور ژن DNMT1 توسط انجام PCR با پرایمر های اختصاصی و الکتروفورز محصولات PCR بر روی ژل آگارز تایید شد.
بین میزان قطعات DNA آزاد شده از اسپرم در محیط کشت و رنگ آمیزی CMA3 ارتباط مستقیم و معنی داری مشاهده گردید (05/0P<). بین میزان قطعات DNA آزاد شده از اسپرم در محیط کشت و حضور ژن DNMT1 ارتباط مستقیم و معنی داری وجود دارد (05/0P<). ارتباط معنی داری بین کمبود پروتامین و حضور ژن DNMT1 در قطعات آزاد شده از اسپرم مشاهده نشد.
مطالعه ی حاضر بیانگر این امر است که انکوباسیون اسپرم های دارای کمبود پروتامین منجر به آزاد شدن قطعات بیشتری از DNA اسپرم می گردد که در نهایت سلامت جنین های حاصل از این اسپرم ها را تحت تاثیر قرار می دهد.