طراحی و بررسی مقایسه ای روش های مولکولی تشخیص سریع مقاومت به داروهای تزریقی ضد سل در سویه های کلینیکی میکوباکتریوم توبرکلوزیس

در این تحقیق، برای تشخیص سریع مقاومت به کانامایسین، آمیکاسین، کاپرئومایسین، چند روش مولکولی طراحی و مقایسه شدند.
از میان 120 سویه کلینیکی مایکوباکتریوم توبرکلوزیس، 70 سویه برای بررسی موتاسیون های احتمالی انتخاب شدند. در روش PCR-RFLP از آنزیم ajii برای تشخیص سویه وحشی و از آنزیم BstFNI برای شناسایی سویه موتانت استفاده شد. علاوه بر این، در طراحی روش آلل اسپسیفیک همزمان (m As PCR) از سه پرایمر اختصاصی برای تعیین حالت های وحشی و نیز موتان کدون های 1401 و 1402 استفاده شد. تعدادی از سویه ها تعیین توالی (سکوئنس) شدند.
در روش PCR - RFLP از میان 70 سویه مورد بررسی، با آنزیم BstFNI، 17 سویه موتان از میان 24 سویه مقاوم فنوتیپی و 44 سویه غیر موتان از 46 سویه، حساس تشخیص داده شدند. حساسیت این روش 83/70 و ویژگی آن 65/95 درصد بود. آنزیم ajii از میان 52 سویه مورد بررسی، 12 سویه موتان از میان 20 سویه مقاوم و 29 سویه غیر موتان را از میان 32 سویه حساس فنوتیپی تشخیص داد. حساسیت این روش 60 و ویژگی آن 62/90 درصد بوده است. در روش آلل اسپسیفیک 23 سویه بررسی شدند. این روش قادر به تشخیص 3 سویه موتان از میان 6 سویه مقاوم و 12 سویه غیرموتان از میان 17 سویه حساس فنوتیپی شد. حساسیت این روش 50 و ویژگی آن 58/70 درصد بوده است. نتایج تعیین ترادف اثبات کننده صحت نتایج روش های مولکولی استفاده شده، بود.
روش PCR - RFLP با آنزیم BstFNI، به عنوان یک روش سریع در تشخیص مقاومت مایکوباکتریوم توبرکلوزیس به داروهای تزریقی خط دوم درمان سل پیشنهاد می شود.