کلون، امتزاج و بیان نوترکیب ناحیه 4 آنتی ژن حفاظت کننده باسیلوس آنتراسیس با زیرواحد B کلرا توکسین در باکتری اشرشیاکلی

پیام:
چکیده:
زمینه و هدف
ترکیب یا اتصال ژنتیکی آنتی ژن ها با زیر واحد B کلرا توکسین =cholera toxin B) (ctB پاسخ آنتی بادی موکوسی قوی ای را ایجاد می کند. هدف از این مطالعه اتصال ctB به ژن کد کننده ناحیه 4 آنتی ژن حفاظت کننده (Protective antigen Domain 4=PaD4) به منظور بیان پروتئین کایمریک به عنوان کاندیدا واکسن علیه بیماری سیاه زخم می باشد.
روش بررسی
در این تحقیق تجربی آزمایشگاهی واکنش PCR با پرایمرهای اختصاصی برای ژن های ctBو PaD4 انجام شد و ژن های تکثیر شده به طور جداگانه در PGEM-T easy vector کلون شدند. سپس ژن PaD4 به انتهای ''3 ژن ctB با روش هضم آنزیمی متصل شد و ژن امتزاج شده ctB-PaD4 در PET28a زیر همسانه سازی گردید. سویه BL21 باکتری E.coli توسط وکتور نوترکیب ترانسفورم شد و بیان پروتئین کایمر تحت القای ایزوپروپیل- بتا-D-1-گالاکتوپیرانوزید IPTG)) قرار گرفت و به وسیله تکنیک SDS.PAGE و وسترن بلات مورد ارزیابی قرار گرفت.
یافته ها
ژن امتزاج شده ctB-PaD4 ساخته شد و با تکنیکPCR و تعیین توالی مورد تایید قرار گرفت. این ژن در باکتری E.coli سویه BL21در دمای بهینه 37 درجه سانتیگراد بیان گردید و پروتئین کایمر با موفقیت تولید شد. باند مربوط به این پروتئین با تکنیک SDS.PAGE و وسترن بلات تایید گردید.
نتیجه گیری
این پروتئین نوترکیب بعد از بررسی ایمنی زایی می تواند به عنوان واکسن زیر واحدی کایمر جدید و موثر علیه باکتری باسیلوس آنتراسیس به صورت خوراکی یا استنشاقی استفاده شود.
زبان:
فارسی
صفحات:
61 تا 69
لینک کوتاه:
magiran.com/p1136210 
دانلود و مطالعه متن این مقاله با یکی از روشهای زیر امکان پذیر است:
اشتراک شخصی
با عضویت و پرداخت آنلاین حق اشتراک یک‌ساله به مبلغ 990,000ريال می‌توانید 70 عنوان مطلب دانلود کنید!
اشتراک سازمانی
به کتابخانه دانشگاه یا محل کار خود پیشنهاد کنید تا اشتراک سازمانی این پایگاه را برای دسترسی نامحدود همه کاربران به متن مطالب تهیه نمایند!
توجه!
  • حق عضویت دریافتی صرف حمایت از نشریات عضو و نگهداری، تکمیل و توسعه مگیران می‌شود.
  • پرداخت حق اشتراک و دانلود مقالات اجازه بازنشر آن در سایر رسانه‌های چاپی و دیجیتال را به کاربر نمی‌دهد.
دسترسی سراسری کاربران دانشگاه پیام نور!
اعضای هیئت علمی و دانشجویان دانشگاه پیام نور در سراسر کشور، در صورت ثبت نام با ایمیل دانشگاهی، تا پایان فروردین ماه 1403 به مقالات سایت دسترسی خواهند داشت!
In order to view content subscription is required

Personal subscription
Subscribe magiran.com for 50 € euros via PayPal and download 70 articles during a year.
Organization subscription
Please contact us to subscribe your university or library for unlimited access!