بررسی بیان microRNA های خانوادهlet-7 در سلول های CD+4 T تحت القاء آنتی بادی های C D2،CD3،CD28 و اینترلوکین 2 و تعیین اهداف احتمالی آن ها

در این تحقیق بیان microRNA های خانواده let-7 در سلول های CD4+T فعال شده با آنتی- CD2،CD3،CD28 تحت تیمار با اینترلوکین 2 و یا بدون تیمار با آن مورد بررسی قرار گرفت. خانواده let-7 دارای دو خاصیت انکوژنی و مهارکنندگی تومور در سلول های مختلف است.
به این منظور سلول های CD4+T بکر با ریز دانه های حاوی آنتی- CD2،CD3،CD28 تیمار شدند و تحت القاء اینترلوکین 2 خارجی (75/0 نانوگرم بر میلی لیتر) به مدت 72 ساعت قرار گرفتند. از سلول های فعال شده و سلول های تحت تیمار با اینترلوکین 2، RNA تام استخراج گردید. بعد از سنتز cDNA، بیان microRNA ها به روش Q-RT-PCR array با استفاده از کیت (miRCURY LNATM universal RT miRNA PCR kit). صورت گرفت. آنالیز داده ها به کمک نرم افزار GeneX و روش ∆∆ Ct انجام شد.
در سلول های CD4+T فعال شده با آنتی- CD2،CD3،CD28 در مقایسه با سلول های تحت تیمار اینترلوکین 2 افزایش بیان 5 عضو خانواده let-7 مشاهده گردید. از جمله اهداف پیش بینی شده آن ها به کمک miRDB و miRanda می توان به فسفاتازهای DUSP، PTPN و خانواده SOCS اشاره نمود که دو خانواده اولی در مهار مسیر پیام رسانی TCR و آخری در مهار مسیر JAK/STAT در سلول های فعال شده نقش دارد.
به نظر می رسد miRNA های مختلف از جمله خانواده let-7 با مهار بیان ژنهای خاص در سطح پس از رونویسی در کنترل مسیرهای موثر در گسترش کلونی جهت ایجاد پاسخ مناسب ایمنی در سلول های CD4+T فعال شده نقش مهمی ایفا کنند.