فاکتورهای موثر بر انتقال ژن DREBIA در بذرهای دو نیم شده ذرت رقم B73 با استفاده از تفنگ ژنی

با وجودی که جنین های نارس به عنوان قطعه جدا کشت مناسب و کارا برای تراریختی ژنتیکی گیاه ذرت پیشنهاد می شوند ولی دارای محدودیتهایی هم هستند که از آن جمله می توان به وابستگی آن به ژنوتیپ، زمان بر بودن و مهم تر از همه نیازمندی به سیستم گلخانه ای مناسب در طول سال برای دسترسی دایم به آن اشاره نمود. در پژوهش حاضر، قطعات جداکشت بذرهای دونیم شده اینبرد لاین B73 ذرت برای تراریختی ژنتیکی مورد استفاده قرار گرفت. برای این منظور سازه ژنی pCA-35S-DREB حاوی فاکتور رونویسی DREB1A گیاه آرابیدوپسیس (برای مقاومت به تنش های غیر زیستی) تحت کنترل پیشبر CaMV 35S و نشانگر انتخابی bar با استفاده از تفنگ ژنی به بذرهای دونیم شده ذرت منتقل شدند. به منظور بهینه سازی پارامترهای موثر در تراریختی بمباران در دو فاصله 6 و 9 سانتی متری، یک یا دو مرحله بمباران و پیش تیمار قطعات جداکشت مورد ارزیابی قرار گرفتند. نتایج حاصل نشان داد که دو مرحله بمباران در فاصله 9 سانتی متری همراه با اعمال پیش تیمار می تواند بیان موقت ژن gus را در بذرهای دونیم شده بهبود بخشد. آنالیز PCR حضور ژن DREB1A و bar را در یکی از 11 گیاهچه رشد کرده در حضور علف کش PPT به اثبات رساند. این نتایج نشان داد که بذرهای دونیم شده لاین B73 می توانند در تراریختی ذرت مورد استفاده قرار گیرند.